Auxílio à pesquisa 14/19793-3 - Extração líquido-líquido, Líquidos iônicos - BV FAPESP
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Otimização e aumento de escala de processos com líquidos iônicos como nova ferramenta de purificação da proteína verde fluorescente recombinante produzida por Escherichia coli "GFPurIL"

Processo: 14/19793-3
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Química - Tecnologia Química
Acordo de Cooperação: Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT)
Pesquisador responsável:Sandro Roberto Valentini
Beneficiário:Sandro Roberto Valentini
Pesquisador Responsável no exterior: João Manuel da Costa e Araújo Pereira Coutinho
Instituição Parceira no exterior: Universidade de Aveiro (UA), Portugal
Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Pesquisadores associados:Adalberto Pessoa Junior ; Jorge Pereira ; Mara Guadalupe Freire Martins ; Sónia Patrícia Marques Ventura ; Valéria de Carvalho Santos Ebinuma
Assunto(s):Extração líquido-líquido  Líquidos iônicos  Biomarcadores  Proteínas de fluorescência verde  Purificação de proteínas  Escherichia coli 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Aqueous Two-Phase Systems | Biomarker Proteins | Green Fluorescent Protein | ionic liquids | Liquid-liquid Extraction | Purification | Engenharia de Bioprocessos

Resumo

As indústrias Farmacêutica e Biotecnológica têm como novos desafios a utilização de proteínas como terapêuticas inovadoras e vitais para o tratamento de doenças bastante complexas. Contudo, o controlo da sua produção e/ou identificação de sua aplicabilidade e eficácia requer um desenvolvimento de novas biomarcadores e bionsensores. Desse modo, a facilidade deteção da Proteína Verde Fluorescente (GFP) levou a que a mesma se tenha tornado um dos biomarcadores biológicos mais promissores. Contudo, tal como as outras proteínas/enzimas produzidas por microorganismos, a sua produção e purificação é bastante complexa e extremamente dispendiosa, o que limita uma larga utilização da GFP. Assim, este projeto propõe como metodologia alternativa e mais sustentável o uso de Sistemas de Duas Fases Aquosas com Líquidos Iônicos (IL-ATPS) na purificação e isolamento da GFP recombinante produzida por Escherichia coli. De forma a atingir este objectivo, este projeto irá começar com a expressão e produção da GFP, e posteriormente a optimização da sua purificação a partir dos meios fermentados utilizando quatro abordagens diferentes de IL-ATPS. Então, será realizado o respetivo aumento de escala dos sistemas de purificação optimizados em escala laboratorial para uma escala piloto. Sumariando, com este projeto pretende-se desenvolver e estudar a aplicabilidade industrial de uma nova tecnologia de downstream para a produção de GFP, a qual poderá ser depois aplicada para outras proteínas e bioprodutos de valor acrescentado. (AU)

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Publicações científicas (18)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
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LOPES, CAMILA; DOS SANTOS, NATHALIA VIEIRA; DUPONT, JANA; PEDROLLI, DANIELLE BISCARO; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; SANTOS-EBINUMA, VALERIA DE CARVALHO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. Improving the cost effectiveness of enhanced green fluorescent protein production using recombinant Escherichia coli BL21 (DE3): Decreasing the expression inducer concentration. Biotechnology and Applied Biochemistry, v. 66, n. 4, p. 527-536, . (14/16424-7, 18/50009-8, 14/19793-3, 16/07529-5)
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