Análise epigenética dos genes envolvidos na resposta de interferon tipo I e perfil funcional de células da imunidade inata e adaptativa em casais sorodiscordantes para o HIV-1

Resumo

Há alguns indivíduos que mesmo após repetidas exposição ao HIV-1 pelo parceiro infectado mantêm-se soronegativos e são denominados de indivíduos expostos ao HIV-1 e não infectados (ENIs). Além dos fatores genéticos e virológicos, os fatores de imunidade inata capazes de potencializar a resposta adaptativa do ENI podem estar associados na resistência à infecção por HIV. Entre os parâmetros de imunidade inata, os fatores de restrição viral, a resposta de interferon tipo I e a função efetora de células Natural killer (NK) induzido pela ativação de receptores Toll-like (TLR), necessitam de maiores informações nos ENIs. Da mesma forma, há escassa evidencia sobre o perfil polifuncional das células TCD4+ e TCD8+. Além disto, não está determinado se as mudanças epigenéticas podem influenciar no controle da resposta imunológica inata ou adaptativa dos ENIs. O objetivo desse estudo será avaliar parâmetros moleculares e epigenéticos (metilação e microRNAs) relacionados a resposta imune inata e a adaptativa, bem como a capacidade polifuncional de células NK e células T em casais sorodiscordantes e comparados com casais concordantes e indivíduos sadios. Para avaliar a imunidade inata, será analisado o perfil de expressão de fatores de restrição viral em células do epitélio oral e em células mononucleares do sangue periférico, e a presença de fatores antimicrobianos e quimiocinas será determinada no fluido oral e no soro. Na abordagem de imunidade inata, inclui a análise da resposta funcional das células NK do sangue periférico induzidos pela ativação de TLR3. Quanto à resposta adaptativa, será avaliado o perfil de monofuncional (Th1, Th17, Th22, Tc22) e polifuncional na produção de citocinas (IL-17, IL-22, IL-2, IFN-³, MIP-1²) e de citotoxicidade induzidas por Gag do HIV-1 em células T CD4+ e T CD8+. A questão epigenética em células NK e das células TCD4+, será avaliada quanto ao grau de metilação de genes do promotor de citocinas ou genes de IFN tipo I e II (enzimas de restrição e imunoprecipitação de cromatina) e expressão de microRNAs (84 miRNAs) envolvidos na resposta pró/anti-inflamatória. Esses dados nos permitirão compreender correlatos de resistência ao HIV-1 e poderão favorecer o desenvolvimento de adjuvante de vacinas ao HIV-1. (AU)