Biossíntese de isoprenóides em Plasmodium falciparum: avaliação de possíveis alvos para a obtenção de novas drogas anti-maláricas

Resumo

Um fato que favorece o aumento da morbidade e mortalidade da malária no mundo é a resistência aos quimioterápicos que o parasita apresenta. Portanto, faz-se necessária a identificação de novos alvos potenciais específicos no parasita, a fim de podermos executar um planejamento racional. O presente projeto se destina a complementar os estudos que já estão sendo desenvolvidos em nosso laboratório sobre a biossíntese de isoprenóides nas formas intraeritrocíticas de Plasmodium falciparum. Todos os isoprenóides derivam de um precursor comum, o pirofosfato de isopentenila e seu isômero pirofosfato de dimetilalila sendo as enzimas preniltransferases as responsáveis por catalisar a condensação sequencial das unidades isoprênicas. Uma via ativa que biossintetiza filoquinona, menaquinona e tocoferol nas formas intraeritrocíticas de P. falciparum foi demonstrada recentemente em nosso laboratório. No presente projeto propomos avaliar a função antioxidante do ±-tocoferol, ³-tocoferol e filoquinona nas formas intraeritrocíticas de P. falciparum, assim como caracterizar a presença de fitol livre proveniente da degradação de toforerol e filoquinona e, verificar se estas vitaminas podem ser biossintetizadas a partir do fitol. Na enzima bifuncional octaprenil-PP sintase/fitoeno sintase serão finalizados os estudos cinéticos e sua interação com os inibidores nerolidol e esqualestatina e verificando a especificidade destes inibidores pela super-expressão desta enzima no parasita. Os isoprenoides especificamente o farnesil-PP se liga ao anel heme para poder localizar-se na mitocôndria das células. A biossíntese do heme em parasitas da malária representa um caminho híbrido e singular partilhada entre a mitocôndria e o apicoplasto, por isso pretendemos identificar o Heme O e Heme A assim como as enzimas COX10 e COX15 durante o desenvolvimento intra-eritrocítico de Plasmodium falciparum. Com os resultados obtidos in vitro no projeto anterior pretendemos neste projeto avaliar a esqualestatina e o nerolidol como potenciais drogas antimaláricas in vivo em camundongos infectados com Plasmodium berghei. (AU)