EMU concedido no processo 2013/13309-0 - aquisição do sistema de eletroforese capilar com detector de fluorescência - Beckman Coulter

Resumo

Os estudos de correlação estrutura-função em hidrolases glicosídicas permitem desvendar diversas estratégias para termoestabilidade, especificidade e modulação - conhecimentos que podem ser empregados para o desenvolvimento do uso otimizado dessas enzimas em processos biotecnológicos, além de subsidiarem o desenho racional de enzimas. Porém, estudos mais aprofundados quanto aos determinantes estruturais para os diversos modos de ação dessas enzimas sobre os substratos, que seria um próximo passo nas investigações, estão limitados ao fato de não se conhecer os modos de ataque ao substrato e seus produtos formados. A caracterização dos produtos de clivagem aliado com estudos de mutagênese sítio-dirigida e a estrutura tridimensional permitem elucidar as bases moleculares do modo de ação dessas enzimas e fornece um entendimento além do que as atuais ferramentas disponíveis permitem. O principal experimento que será rotineiramente realizado neste equipamento é a análise de produtos de reação de hidrolases glicosídicas e para isso, os produtos serão marcados com APTS, uma molécula fluorescente. Assim, para sua detecção é estritamente necessário o acoplamento de um módulo de excitação e detecção de fluorescência. Uma grande variedade de enzimas inéditas tem sido descobertas seja pelo sequenciamento de novos genomas bem como por abordagens metagenômicas e o entendimento dos produtos formados com a caracterização bioquímica e cinética seria crucial para avaliar o potencial biotecnológico dessas enzimas. Hoje o estado-da-arte em estudos sobre aspectos funcionais e estruturais de GHs, tem como pontos fortes a determinação da estrutura tridimensional das enzimas conjugado com uma caracterização funcional detalhada, o que inclui impreterivelmente análise de produtos de clivagem de enzimas selvagens e mutantes. Com este equipamento serão alcançados resultados mais aprofundados e de melhor qualidade no ponto de vista da mecanística dessas enzimas. O Laboratório Automatizado de Cristalização de Proteínas já é uma realidade no LNBio e aliado às estruturas tridimensionais obtidas, poderão ser alcançados novos resultados sobre o modo de ação de enzimas glicosídicas com o novo Sistema de Eletroforese Capilar. Esta aquisição irá ampliar e integrar a capacidade de pesquisa do LNBio, bem como de outras Universidades e Instituições interessadas. (AU)