Reconstrução da superfície ocular: aspectos básicos, clínicos e cirúrgicos

Resumo

Desordens da Superfície Ocular e do Filme Lacrimal são consideradas como um grupo heterogêneo de doenças que causam baixa da acuidade visual em um grande número de pacientes. Incuem olho seco, pterígio, degenerações/distrofias superficiais corneais, displasias entre outros. Os casos mais graves de DSOFL são as ceratoconjuntivites cicatriciais secundárias a queimadura química, síndrome de Stevens-Johnson (SSJ) e penfigóide cicatricial, que muitas vezes levam a seqüelas de difícil resolução clínica e cirurgicamente. Devido ao grande número de casos e dificuldades no tratamento, essas afecções constituem um problema sócio-econômico dramático, especialmente nos países em desenvolvimento. O Projeto Temático "Reconstrução da Superfície Ocular: aspectos básicos, clínicos e cirúrgicos" é um projeto multidisciplinar da UNIFESP, que conta com a participação de mais duas instituições universitárias nacionais e uma internacional, para desenvolver 16 projetos de pesquisa (5 em área básica (PE) e 11 clínico-cirúrgicos (PCC)), com os seguintes objetivos: avaliar a ultra-estrutura e aspectos bioquímicos e moleculares da membrana amniótica na reconstrução da superfície ocular; desenvolver tecnologia na produção de membrana amniótica colonizada ex-vivo por epitélio corneal; analisar as alterações da superfície ocular por diferentes métodos diagnósticos especializados; avaliar novos tratamentos para olho seco; avaliar a eficácia das cirurgias de reconstrução da superfície ocular utilizando membrana amniótica associada ou não ao transplante de limbo nas Desordens da Superfície Ocular. Resumidamente, serão apresentados os métodos utilizados para cada protocolo:-PE-1: Microscopia eletrônica de Transmissão e Varredura em membrana amniótica fresca e preservada por dois métodos diferentes (DMSO e glicerol e meio de cultura 1: 1)-PE-2: Quantificação de fatores de crescimento (fator recombinante de crescimento epitelial humano (EGF), fator de crescimento fibroblástico (FGF-4, FGF-básico), fator de crescimento de hepatócito (HGF), Fator de crescimento do queratinócito (KGF), Fator de crescimento transformante beta (TGF-b)), interleucinas (IL-4 e IL-10) e prostaglandinas (PGE2) na membrana amniótica preservada e fresca por ELISA. - PE-3: Identificação e quantificação do RNAm e proteínas dos fatores de crescimentos e citocinas nas membranas amnióticas humanas por técnicas de PCR, "Northern blot" e "Western blot" - PE-4: Uso da membrana amniótica em ceratoconjuntivite cicatricial experimental em coelhos. Será realizado um estudo experimental randomizado, onde avaliar-se-á a cicatrização corneana sob o ponto de vista clínico, bioquímico e imunohistoquímico após a aplicação da membrana amniótica humana preservada em córneas com e sem deficiência límbica severa. - PE-5: Membrana amniótica colonizada por epitélio corneal limbar: análise ultra-estrutural, de proliferação celular (imunofluorescência com Ki-67), apoptose (método morfológíco com Hoechst 33342) e imunohistoquímica/FACS para determinar a expressão das citoqueratinas epiteliais - PCC-1: Avaliação clínica e citológica do transplante de células germinativas corneais e membrana amniótica nas cirurgias reconstrutivas da superfície ocular nas deficiências limbares secundárias a síndrome de Stevens-Johnson e penfigóide cicatricial ocular - PCC - 2: Estudo prospectivo comparando aleatoriamente transplante de limbo associado ou não ao uso de membrana amniótica para reconstrução da superfície ocular nas queimaduras químicas crônicas com deficiência limbar total. - PCC-3: Avaliação clínica e citológica do uso de membrana amniótica colonizada ex vivo por epitélio limbar na reconstrução da superfície ocular de olhos portadores de deficiência limbar total resistentes ao tratamento convencional. - PCC-4: Estudo prospectivo comparando aleatoriamente transplante de membrana amniótica versus transplante de conjuntiva para o tratamento de pterígio recidivado. - PCC-5: Avaliação clínica do uso de uma ou mais camadas de membrana amniótica no tratamento dos afinamentos corneais e esclerais - PCC-6: Estudo prospectivo comparando aleatoriamente transplante de membrana amniótica versus punção estromal anterior para o tratamento da ceratopatia bolhosa em pacientes sintomáticos. - PCC-7: Avaliação clínica prospectiva comparando aleatoriamente tratamento clínico versus tratamento clínico e transplante de membrana amniótica como lente de contato biológica nas queimaduras químicas ou térmicas agudas graus III e IV - PCC-8: Investigação das alterações corneais humanas em nível celular usando microscopia confocal in vivo antes e após reconstrução da superfície ocular em casos de queimadura química não portadores de olho seco grave. Avaliar-se-ão também casos de deficiência limbar total de pacientes com doenças cicatriciais severas da córnea e conjuntiva (queimadura, penfigóide cicatricial, eritema multiforme). Comparar-se-ão os resultados obtidos com avaliação de microscopia confocal da superfície ocular de pacientes normais. - PCC-9: Estudo prospectivo tipo caso-controle, no qual será avaliado comparativamente a eficácia dos testes de Schirmer tipo I, II e o teste dinâmico do Clearance de Fluoresceína Lacrimal (C.F.L.) no diagnóstico diferencial em pacientes portadores de ceratoconjuntivites crônicas não-infecciosas. - PCC-10: Padronização da técnica de citologia de impressão, corados com PAS e Papanicolau, para o estudo do efeito da remoção do limbo e conjuntiva nos doadores de enxerto limbares de córnea. - PCC-11: Avaliação clínica e citológica do uso de ciclosporina tópica 0,2% no tratamento da ceratoconjuntivite sicca. (AU)