Obtenção e caracterização de animais Pomc-/- induzíveis para o estudo do papel dos peptídeos derivados da POMC, na diferenciação e manutenção da glândula adrenal

Resumo

Estudos em animais "knockout" para o gene da Pró-opiomelanocortina (Pomc-/-) demonstraram que, os animais que sobrevivem à fase adulta, apresentaram obesidade, defeitos na pigmentação e insuficiência adrenal severa. Quando neonatos, a glândula adrenal estava presente macroscopicamente, entretanto decorridas cinco semanas após o nascimento, observou-se uma atrofia severa de todo o órgão, refletindo a dependência dos peptídeos derivados da POMC para a diferenciação, maturação e manutenção da glândula adrenal. O hormônio adrenocorticotrófico (ACTH) é considerado o principal fator derivado da POMC que atua na glândula adrenal, seja no desenvolvimento, na manutenção ou na esteroidogênese. Apesar de existirem evidências, inclusive do nosso grupo, que os peptídeos da porção N-terminal (N-POMC), possam atuar na manutenção da glândula adrenal, através da indução da proliferação em zonas específicas do córtex adrenal, ainda não se sabe qual a importância destes peptídeos na diferenciação, maturação, e função do córtex adrenal. Esse projeto tem como finalidade a obtenção de animais que possuam um sistema "knock-out" condicional Cre-Lox induzível por tamoxifeno com a finalidade de silenciar o gene Pomc em camundongos, em períodos específicos do desenvolvimento. Com a obtenção desses animais teremos como objetivo avaliar o papel de diferentes tipos e tamanhos de peptídeos N-POMC terminais, sintéticos e extratos, na arquitetura do córtex adrenal, na função da glândula, na ingestão alimentar e na alteração do peso corpóreo durante o período de diferenciação da glândula, que ocorre após o nascimento. A arquitetura da glândula será analisada por imunoflurescência utilizando anticorpos para detectar células em proliferação, em apoptose, positivas para enzimas esteroidogênicas, para marcador específico de zona fetal (Zona X), além da detecção de proteínas da matriz extracelular e de vasos. A capacidade funcional da glândula adrenal será analisada por quantificação da concentração da corticosterona e aldosterona no plasma sanguíneo. Os resultados obtidos contribuirão para elucidar o papel dos peptídeos N-terminal da POMC na diferenciação e função da glândula adrenal. (AU)