Programa para visita do prof. Michael Butler: capacitação em glicosilação em proteínas recombinantes

Resumo

A visita do Prof. Michael Butler tem como objetivo a capacitação de pesquisadores do Instituto Butantan (LIV) e da Unifesp (ICT, Campus São José dos Campos) no tema Modificações pós-tradução (MPT) de proteínas recombinantes, focando mais especificamente as glicosilações que têm enormes implicações na qualidade dessas moléculas. Uma vez que este programa contempla um curso de pós-graduação, a referida capacitação estará acessível a pesquisadores e alunos de outras instituições do Estado de São Paulo. As ditas glicoproteínas apresentam, frequentemente, estrutura molecular tridimensional complexa, caracterizada por uma sequência de aminoácidos e pelas ligações químicas entre esses, bem como nas MPT adicionais que são determinantes para a conformação final da proteína e sua atividade biológica (1-3). Essas MPT ocorrem no interior das células após a síntese da cadeia polipeptídica e podem envolver, entre outras, a formação de pontes de dissulfeto, ³-carboxilações, hidroxilações e O- e N-glicosilações, sendo as últimas as mais frequentes nesse tipo de molécula, logo as mais estudadas (3). As glicosilações são processos enzimáticos que ocorrem no retículo endoplasmático e no complexo de Golgi, que ligam, de forma sequencial, cadeias de carboidratos (glicanos) à cadeia polipeptídica recém sintetizada. Essas estruturas representam até 45% do peso molecular (3) e são responsáveis pelas principais características biológicas (1). A secreção de produtos de reações enzimáticas incompletas resulta em glicoformas distintas, cujo perfil depende diretamente das condições de cultivo empregadas (2-4). Os modelos de expressão celular utilizados, todos eucarióticos, também são determinantes. Nesse tipo de sistema de expressão, mais do que em qualquer outro, o processo determina o produto final e sua qualidade (2,4). Essas MPT têm extrema relevância para projetos atuais e futuros desenvolvidos no e IBu-LVI e Unifesp-ICT (vide arquivo anexo), mas na tentativa de nos capacitarmos melhor para esse tipo de abordagem, identificamos uma lacuna de competências no Brasil, sobretudo na questão mais aplicada ou tecnológica. A presente proposta visa, portanto, preencher essa deficiência de conhecimento, o que deve ser dar na forma de um curso de Pós-Graduação (aberto a participantes não acadêmicos) e umas série de reuniões com o Prof. Butler para discussões mais específicas das necessidades de nossos projetos. O programa inclui ainda visitas a laboratórios em São Paulo parceiros de nossos grupos (EPUSP, FEQ-Unicamp, DEQ-USCar, IPEN, IPT) ou que já mantêm estreitas relações com o Prof. Butler (IQ-USP). O Prof. Bulter é um especialista renomado, com inúmeras publicações em revistas especializadas (mais de 120 artigos e capítulos de livros), livros (7), muitos delas na temática específica do curso proposto, além de editor de várias revistas. É também um colaborador de longa data dos proponentes desta disciplina, bem como de outros pesquisadores e instituições brasileiras: ele editou livro em parceria com os proponentes (ver Ref. 3); Elisabeth Augusto e Ana Moro (IBu) participaram do comitê organizador do 8th PEACE Conference (Protein expression in animal cells), presidido pelo Prof. Butler (Angra dos Reis, RJ, 2007); ele ministrou o minicurso "Animal cell cultivation" (XIII Sinaferm, UFSCar, São Carlos, 1996); ele recebeu pesquisadores brasileiros em seu laboratório para treinamentos específicos (ex.: Tatiane Coelho-IQUSP, 2011; Elisabeth Augusto em 1994). 1. WALSH G, JEFFERIES R. Nature Biotechnology. v. 24, p.241-1252, 2006.2. SCHELLKENS H. Nephrology Dialysis Transplantation Plus, v.2, p.i27-i36, 20093. BUTLER M. Post-translational modification of recombinant proteins. In: Castilho LR, Moraes AM, Augusto EFP, Butler M (eds). Animal cell technology. Roca Editora: São Paulo, 2008, 518p.4. KANNICHT C (ed). Post Translational Modifications of Proteins. Humana Press, 2008, 390p. 5. CHA HJ et al. Bioch Eng J, v. 24, p. 225-233, 2005. (AU)