Desenvolvimento da microbiota oral de bebês em relação à saúde bucal e geral: análise longitudinal por pirosequenciamento da microbiota de bebês e seus parentes dentro de um Programa de Saúde bucal para primeira infância

Resumo

Definir a microbiota bucal de bebês e como ela se altera com o tempo seria de grande importância para a prevenção, diagnóstico e tratamento de doenças bucais num estágio precoce. O objetivo desse estudo é avaliar a colonização microbiana de crianças atendidas em um programa de saúde bucal para bebês aos 6, 12, 18 e 24 meses e associar a diversidade microbiana com dieta, higiene bucal, presença de dentes, prevalência de cárie, condições periodontais em comparação com as condições bucais e diversidade microbiana dos pais/responsáveis. Oitenta bebês saudáveis serão acompanhados aos 6, 12, 18 e 24 meses. A ingestão de alimentos e higiene bucal serão avaliadas por meio de questionário. Serão coletados saliva, biofilme dentário do bebê e dos pais/responsáveis para análise da diversidade microbiana por pirosequenciamento. Será realizada também avaliação das condições gengivais e índice de cárie da criança e responsáveis e a cronologia de erupção dentária do bebê. Para a análise molecular 5 bebês saudáveis serão selecionados. E após a extração e quantificação do DNA, uma biblioteca de produtos de PCR da região hipervariável dos genes V5-V6 será gerada para cada amostra. As bibliotecas de amplicons serão seqüenciadas unidirecionalmente na direção reversa pelo Sistema de Seqüenciamento de Genoma FLX (GS-FLX). Será utilizado o algorítmo GAST para calcular a diferença percentual entre cada seqüência e sua correspondência mais próxima a um banco de dados de seqüências V5-V6 de Eubactérias e Arqueobactérias. Os grupos taxonômicos serão designados para cada sequência de referência completa, utilizando diversas fontes. O Índice de Diversidade de Shannon Index e a Análise do Componente Principal serão obtidos utilizando o programa PAST. (AU)