Citotoxicidade transdentinária e efeito da carbodiimida (EDC) na degradação da união resina dentina: estudos in vitro e in vivo

Resumo

O objetivo geral deste trabalho, dividido em 3 experimentos, será avaliar a citotoxicidade transdentinária de soluções de carbodiimida (EDC) em diferentes concentrações, bem como a influência da aplicação dessa substância sobre a resistência de união imediata e em longo prazo in vitro de um sistema adesivo à dentina e a estabilidade longitudinal da união resina-dentina in vivo. Experimento #1: Avaliar a citotoxicidade transdentinária de soluções de EDC em 3 diferentes concentrações, sobre células odontoblastóides MDPC-23. Terceiros molares humanos hígidos (n=60) serão seccionados para a obtenção de discos de dentina de 0,4 mm de espessura. Os discos terão sua permeabilidade aferida e serão distribuídos em 6 grupos. Após posicionamento em câmaras pulpares artificiais, células MDPC-23 serão plantadas sobre o lado pulpar do disco, sendo que sobre o lado oclusal, após condicionamento com ácido fosfórico, será aplicado: água deionizada (controle negativo), solução tampão cacodilato 0,05M, solução de EDC em 0,1M, 0,3M ou 0,5M, ou peróxido de hidrogênio 29% (controle positivo). Cada solução será mantida por 60 segundos seguida de lavagem. Será analisado o metabolismo celular (teste de MTT), morfologia celular (MEV), tipo de morte celular (citometria de fluxo) e a formação de espécies reativas de oxigênio (EROs). Experimento #2: Investigar o efeito da aplicação de EDC sobre a resistência de união imediata e em longo prazo de um sistema adesivo simplificado à dentina. Superfícies planas de dentina serão obtidas de terceiros molares hígidos (n=72). A dentina será condicionada com ácido fosfórico 35% e tratada por 30 ou 60 s com solução de EDC (concentração definida no experimento 1) ou receberá apenas a aplicação de água deionizada. Após o tratamento, o sistema adesivo Single Bond 2 será aplicado e blocos de resina serão construídos. Serão obtidos espécimes com área transversal de seção de 0,81 mm2, os quais serão submetidos ao ensaio mecânico de microtração 24 h após sua obtenção ou após armazenamento em saliva artificial (6 e 12 meses). Experimento #3: Avaliar o efeito da aplicação de EDC na qualidade da união resina-dentina produzida em dentes decíduos in vivo. A amostra deste estudo será constituida de, no mínimo, 10 pacientes entre 7 e 11 anos de idade com pelo menos dois molares decíduos com pequena lesão de cárie oclusal. Após sorteio aleatório, um dos dentes será restaurado com compósito sem prévia aplicação de EDC e seu contralateral com a aplicação de EDC (concentração da solução e tempo de aplicação serão determinados nos experimentos 1 e 2, respectivamente). Os dentes serão mantidos em função na cavidade bucal até o momento da esfoliação e posteriormente preparados para análise em MET. Tratamento estatístico dos dados: Os testes estatísticos para todos os experimentos serão definidos após análise dos respectivos conjuntos de dados quanto à aderência a curva normal e homocedasticidade, considerando-se o nível de 5% de significância para a inferência estatística. Adicionalmente, os testes também serão selecionados de acordo com o número de variáveis independentes (fatores de variação) de cada estudo. (AU)