Efeito do laser em baixa intensidade na expressão de fatores regulatórios miogênicos e atividade de metaloprotease de matriz 2 durante regeneração do músculo esquelético de rato após criolesão

Resumo

O laser em baixa intensidade (LBI) é muito utilizado com intuito de promover de forma mais rápida e de melhor qualidade o reparo muscular frente aos diferentes tipos de lesão, porém, muitos estudos na literatura apresentam controvérsias no que diz respeito aos parâmetros dosimétricos. O objetivo do presente estudo será avaliar o efeito do LBI sobre a expressão de fatores miogênicos (MyoD, Myf5, miogenina e MRF4) e da metaloprotease de matriz 2 (MMP2) em músculo tibial anterior de rato após criolesão. Serão utilizados 65 animais divididos aleatoriamente em 05 grupos: (1) Controle; (2) "Sham" (sem lesão, submetido ao procedimento de exposição do músculo tibial anterior (TA); (3) Criolesionados e eutanasiados após 1, 3, 7 dias (4) Sem lesão e tratados com LBI e eutanasiados após 1, 7 e 14 dias e (5)Criolesionados, tratados com LBI eutanasiados após 1, 3 e 7 dias. A criolesão consistirá de duas aplicações de bastão resfriado em nitrogênio líquido diretamente no músculo TA. Será utilizado para o tratamento o laser AsGaAl (780nm) utilizando densidade de energia de 10J/cm², potência de 40mW e tempo de 10 segundos. Para a análise de expressão dos fatores miogênicos será extraído o RNA total do músculo TA e será obtido o cDNA para a realização do PCR em tempo real utilizando primers específicos para MyoD, Myf5, miogenina e MRF4. Além disso, será avaliada a atividade da gelatinase MMP2 utilizando para tal a técnica de zimografia e detecção desta metaloprotease por Western blotting. (AU)