Fator de crescimento de queratinócitos, interleucinas 1 beta, 6, 8, 10, 12 e fator de necrose tumoral alfa em pacientes com queimadura

Resumo

Respostas inflamatórias intensas são desencadeadas em queimaduras que acometem grande superfície corpórea. Alterações nos níveis plasmáticos das citocinas após a queimadura ocorrem na rotina e são características na evolução. Assim, pode ser possível desenvolver intervenções terapêuticas que possam atenuar a resposta inflamatória aguda por diminuição da expressão dessas citocinas A importância dos fatores de crescimento no processo de cicatrização foi demonstrada em cultura de queratinócitos e de fibroblastos. O fator de crescimento de queratinócitos (KGF) é atuante na reepitelização de feridas, sendo o estimulador mitótico mais potente das células epiteliais. Objetivo: Avaliar o nível do KGF, de IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12 e fator de necrose tumoral alfa (TNF-±) no líquido das bolhas e no plasma de pacientes com queimadura, a produção de KGF e citocinas produzidas por cultura de fibroblastos dérmicos primários e sua expressão gênica. Métodos: Serão incluídos 50 pacientes (25 pacientes no grupo estudo e 25 pacientes no grupo controle) internados na Unidade de Tratamento de Queimaduras (UTQ) da Disciplina de Cirurgia Plástica (DCP) da Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) com 20% ou mais de superfície corpórea queimada (SCQ) de segundo grau superficial e profundo com bolhas e com necessidade de realização de escarectomia ou desbridamento cirúrgico. O grupo controle será constituído de pacientes com SCQ menor de 5% de II grau superficial e profundo, com bolhas e que necessitem de cirurgia. A fase in vitro será realizada com cinco pacientes do grupo estudo e cinco do grupo controle, com os mesmos critérios de inclusão e exclusão. Serão avaliados os níveis das citocinas IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70 e TNF-± nas amostras do líquido das bolhas, no plasma e no meio de cultura dos fibroblastos dérmicos primários dos pacientes selecionados utilizando citometria de fluxo. O nível do KGF, nas mesmas amostras, será avaliado através de ELISA. O KGF e o TNF-± terão sua expressão gênica avaliada na cultura dos fibroblastos dérmicos primários dos pacientes selecionados no isolamento. A expressão gênica de KGF e de citocinas será realizada através de RT-PCR e de RT-PCR array. Os experimentos serão realizados em duplicata. Resultados esperados: as citocinas IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12 e TNF-± e o KGF e a expressão gênica poderão estar aumentadas nos pacientes com queimaduras que acometem acima de 20% do corpo. (AU)