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Ação do forskolin, da butirolactona I e da roscovitina na maturação de oócitos bovinos e suas implicações na resistência à criopreservação

Processo: 11/08926-4
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de agosto de 2011 - 31 de julho de 2013
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Fernanda da Cruz Landim
Beneficiário:Fernanda da Cruz Landim
Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Biotecnologia da reprodução 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Criopreservação | fármacos | Inibição | Maturação | Nuclear | Biotécnicas da Reprodução

Resumo

A produção de embriões in vitro (PIV) pela maturação, fecundação e cultivo tornou-se uma valiosa tecnologia de reprodução assistida em sistemas de criação bovina. Entretanto, mesmo com as notáveis inovações neste sistema, o maior entrave para o pleno sucesso desta biotecnologia ainda é o menor índice de prenhez pós-transferência. Sendo assim, muitos laboratórios tentam melhorar o potencial de desenvolvimento e a qualidade do oócito durante a maturação in vitro (MIV). Uma das técnicas mais utilizadas com este objetivo consiste na inibição da maturação meiótica (nuclear) promovendo, ao mesmo tempo, o desenvolvimento do ooplasma. Desta forma este projeto tem como objetivo geral avaliar a ação de inibidores seletivos da quinase dependente de ciclina (butirolactona I e roscovitina) bem como de um ativador da adenilato ciclase (o forskolin) sobre a maturação in vitro de oócitos bovinos e sobre seu desenvolvimento embrionário. Para tanto no experimento 1 será avaliada a maturação nuclear após a exposição dos oócitos a butirolactona I, roscovitina e Forskolon por um período de 12 e 24 horas; será determinada a distribuição das proteínas p34cdc2, ciclina B1, MPF e MAPK nos mesmos oócitos; será avaliado o efeito do tratamento dos oócitos com butirolactona I, roscovitina e forskolin na produção e no ídice de apoptose de embriões e avaliada a ação dos farmacos em embriões produzidos in vitro, com particular enfoque em sua resistência ao processo de vitrificação. No experimento 2 será testado os efeitos da adição de forskolin sobre o cultivo embrionário avaliando se o tratamento do oócito com o forskolin influi na quantidade e distribuição de lipídeos e mitocôndrias nos embriões produzidos, bem como o índice de apoptose de embriões PIV submetidos ao tratamento com forskolin no dia 4,5 ou no dia 6 de cultivo. Alem disso será analisado a resistência dos embriões tratados com forskolin a vitrificação pela a análise do número de celulas (total e viáveis), bem como do índice de apoptose. (AU)

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Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
PASCHOAL, DANIELA MARTINS; DIAS MAZIERO, ROSIARA ROSARIA; SUDANO, MATEUS JOSE; GUASTALI, MIDYAN DAROZ; VERGARA, LUIS EDUARDO; CROCOMO, LETICIA FERRARI; DE LIMA-NETO, JOAO FERREIRA; ONA MAGALHAES, LUIS CARLOS; MONTEIRO, BIANCA ANDRIOLO; RASCADO, TATIANA DA SILVA; et al. In vitro embryos production after oocytes treatment with forskolin. ZYGOTE, v. 24, n. 2, p. 161-171, . (10/50410-2, 11/08926-4)
MAZIERO, ROSIARA ROSARIA DIAS; DE FREITAS GUAITOLINI, CARLOS RENATO; PASCHOAL, DANIELA MARTINS; CRESPILHO, ANDRE MACIEL; OLIVEIRA SESTARI, DANIELLE ANDRESSA; NUNES DODE, MARGOT ALVES; LANDIM-ALVARENGA, FERNANDA DA CRUZ. Effects of the addition of oocyte meiosis-inhibiting drugs on the expression of maturation-promoting factor components and organization of cytoplasmic organelles. REPRODUCTIVE BIOLOGY, v. 20, n. 1, p. 48-62, . (10/18994-4, 11/08926-4)
MAZIERO, ROSIARA ROSARIA DIAS; GUAITOLINI, CARLOS RENATO DE FREITAS; PASCHOAL, DANIELA MARTINS; CRESPILHO, ANDRE MACIEL; MONTEIRO, BIANCA ANDRIOLO; DE LIMA, JONATHAN SOARES; SESTARI, DANIELLE ANDRESSA OLIVEIRA; LANDIM-ALVARENGA, FERNANDA DA CRUZ. Treatment with roscovitine and butyrolactone I prior toin vitromaturation alters blastocyst production. ZYGOTE, v. 28, n. 1, p. 8-pg., . (10/18994-4, 11/08926-4)
PASCHOAL, DANIELA MARTINS; SUDANO, MATEUS JOSE; LANCELLOTTI SCHWARZ, KATIA REGINA; DIAS MAZIERO, ROSIARA ROSARIO; GUASTALI, MIDYAN DAROZ; CROCOMO, LETICIA FERRARI; ONA MAGALHAES, LUIS CARLOS; MARTINS, JR., ALICIO; VERDE LEAL, CLAUDIA LIMA; LANDIM-ALVARENGA, FERNANDA DA CRUZ. Cell apoptosis and lipid content of in vitro-produced, vitrified bovine embryos treated with forskolin. Theriogenology, v. 87, p. 108-114, . (10/50410-2, 14/21289-1, 11/08926-4)

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