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Efeito do fator de transformação de crescimento -beta 1 (TGF-²1) e da dexametasona na biomineralização: estudo in vitro nas vias de sinalização

Processo: 10/18094-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de junho de 2011 - 31 de maio de 2013
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Clínica Odontológica
Pesquisador responsável:Victor Elias Arana-Chavez
Beneficiário:Victor Elias Arana-Chavez
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia (FO). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):11/12748-4 - Efeito do fator de transformação de crescimento - beta 1 (TGF-²1) e da dexametasona na biomineralização: estudo in vitro, BP.TT
Assunto(s):Biologia oral  Fator de crescimento transformador beta1  Calcificação fisiológica  Osteoblastos  Dexametasona  Cultura de células 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:cultura de células | Dexametasona | Mineralização | osteoblastos | TGF- b1 | vias de sinalização | Biologia Oral

Resumo

O sistema de cultura de células tem sido usado rotineiramente em estudos detalhados da formação óssea em ambientes controlados, em que é possível analisar minuciosamente eventos celulares e da MEC. Além das linhagens osteoblásticas, outro sistema in vitro comumente usado é a cultura de células osteogênicas primárias - derivadas de calvárias de rato. Em estudo anterior realizado no nosso laboratório foram testados a dexametasona -Dex (10-7 M) e o TGF-²1 (5 ng/mL), separadamente e simultaneamente, em células osteogênicas derivadas de calvárias de rato e, em todos os tratamentos, houve a expressão das proteínas OPN, BSP e FN. As células tratadas apenas com a Dex formaram nódulos de mineral, mas esses, na maioria das vezes, estavam entre poucas fibrilas de colágeno e/ou depositados sobre o substrato, sugerindo que teria ocorrido uma nucleação espontânea desse mineral. Já quando tratadas com o TGF-²1, foram observadas alterações na morfologia das células, bem como a ausência de componentes da MEC. Por outro lado, quando tratadas com as duas moléculas simultaneamente, a morfologia apresentou-se igual à encontrada nas células tratadas apenas com o TGF-b1; porém, foram observados alguns focos de fibrilas de colágeno. O presente projeto propõe investigar os efeitos moleculares do TGF-b1 e da Dex, bloqueando seus receptores e estudando alguns elementos das respectivas vias de sinalização, bem como a atuação dessas na habilidade de diferenciação das células osteogênicas em diferentes estágios correspondentes à biomineralização, efetuando estudos bioquímicos - atividade de fosfatase alcalina, marcação de nódulos de mineral pelo método de histoquímica; a expressão de proteínas não colágenas como: OPN, BSP, OC e ON, envolvidas nesse processo, através de imunofluorescência com microscopia de confocal, e também a quantificação por Western-blot e RT-PCR. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DONATO, TATIANI A. G.; MARTINEZ, ELIZABETH F.; ARANA-CHAVEZ, VICTOR E.. Effects of TGF-beta 1 on mineralization mediated by rat calvaria-derived osteogenic cells. MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE, v. 79, n. 12, p. 1139-1146, . (10/18094-3, 06/50153-4)

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