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Avaliação do perfil de micro-RNAs e da expressão de genes relacionados ao estresse oxidativo e a resposta inflamatória em micropartículas de pacientes sépticos

Processo: 10/52554-1
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de abril de 2011 - 30 de setembro de 2013
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
Pesquisador responsável:Luciano Cesar Pontes de Azevedo
Beneficiário:Luciano Cesar Pontes de Azevedo
Instituição Sede: Hospital Sírio-Libanês. Sociedade Beneficente de Senhoras (SBSHSL). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Choque séptico  MicroRNAs  Expressão gênica  Estresse oxidativo 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Choque Septico | Disfuncao Organica | Estresse Oxidativo | Exossomos | Microparticulas | Sepse

Resumo

A patogênese da sepse caracteriza-se pela resposta inflamatória exacerbada e produção aumentada de espécies reativas de oxigênio (EROS). EROS podem ser liberadas por microparticulas produzidas após a ativação de diversos tipos celulares. Nossos estudos prévios já demonstraram a presença de um subtipo de micropartículas (exossomos) na circulação de pacientes com choque séptico, os quais induzem apoptose de células vasculares em cultura e disfunção miocárdica ex vivo. Estudos prévios demonstraram que essas partículas contem RNA mensageiro (RNAm) e micro-RNA (miRNA), podendo assim eventualmente atuarem como transmissores de sinalização celular à distância. No entanto, a importância deste mecanismo durante a sepse não foi avaliada. Este estudo visa analisar o padrão de expressão de miRNA global e a presença de genes relacionados ao estresse oxidativo e resposta inflamatória em micropartículas isoladas de pacientes com sepse. Nosso objetivo é comparar estes resultados com os obtidos em voluntários normais e correlacionar os achados com disfunção orgânica e mortalidade. Sangue (20 ml) será coletado de 40 pacientes com choque séptico nas primeiras 48 horas e, para os sobreviventes, após sete dias de diagnóstico. Vinte voluntários sadios servirão como controle. Após o isolamento das microparticulas, seu conteúdo de miRNA e mRNA será avaliado por reação em cadeia de tempo real da polimerase (qPCR). Para a avaliação da expressão dos miRNAs por qPCR, o kit TagMan MicroRNA Array será usado. A avaliação da resposta inflamatória será realizada com o kit Human Immune Array (Applied Biosystems) e o estresse oxidativo nos exossomos será avaliado através do kit Human Oxidative Stress and Antioxidant Defense Array (SABiosciences). (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
REAL, JULIANA MONTE; PINTO FERREIRA, LUDMILA RODRIGUES; ESTEVES, GUSTAVO HENRIQUE; KOYAMA, FERNANDA CHRISTTANINI; SALLES DIAS, MARCOS VINCIUS; BEZERRA-NETO, JOAO EVANGELISTA; CUNHA-NETO, EDECIO; MACHADO, FLAVIA RIBEIRO; SALOMAO, REINALDO; PONTES AZEVEDO, LUCIANO CESAR. Exosomes from patients with septic shock convey miRNAs related to inflammation and cell cycle regulation: new signaling pathways in sepsis?. CRITICAL CARE, v. 22, . (10/52554-1)

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