Avaliação da terapia fotodinâmica em Candida albicans in vitro e in vivo

Resumo

O objetivo do presente estudo será avaliar a ação da Terapia Fotodinâmica (TFD) em Candida albicans in vitro em culturas planctônicas e biofilmes e in vivo em um modelo de candidose experimental em camundongos. Será utilizada cepa padrão de C. albicans (ATCC 18804) para os ensaios. Como fonte de luz será utilizado o Diodo Emissor de Luz (LED) com emissão de luz verde (532±10 nm) e fotossensibilizador eritrosina. O biofilme será formado em placas de 96 poços. Serão utilizados 56 camundongos machos e adultos para o estudo da TFD in vivo. Para a indução da candidose, os animais serão tratados com cloreto de tetraciclina a 0,83 mg/ mL na água de beber e injeções subcutâneas de prednisolona. Os animais serão inoculados com swab embebido na suspensão contendo 108 células/ mL de C. albicans. Após o último tratamento com prednisolona, os animais serão submetidos a TFD mediada pelo corante eritrosina e irradiados por LED. Antes e após os tratamentos, serão recuperadas leveduras da cavidade bucal dos animais. As leveduras recuperadas após a TFD e grupo controle serão avaliadas quanto a interferência da TFD na aderência de C. albicans às células do epitélio bucal humano. Em seguida, os animais serão sacrificados e as línguas retiradas para análise macroscópica e histológica. Os biofilmes, espécimes e lâminas de aderência serão também analisados por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). A análise dos dados de Unidades Formadoras de Colônias por mL será feita por Análise de Variância e Teste de Tukey (p d 0,05) e a quantidade de leveduras aderidas as células bucais serão submetidas ao teste t de Student (p d 0,05). Para avaliação dos escores obtidos na análise macroscópica e histológica serão aplicados os testes de Kruskal-Wallis e Bonferroni. (AU)