Efeito da introdução de de mitocôndrias embrionárias ou somáticas nos zigotos sobre o desenvolvimento e a herança mitocondrial em bovinos

Resumo

Recentes estudos epidemiológicos confirmam que as patologias causadas por mutações no DNA mitocondrial (mtDNA) são uma das principais causas de doenças em humanos, afetando no mínimo uma em 4.000 pessoas. Todavia, devido ao padrão de segregação único dessas patologias, não existem métodos eficientes que impeçam a sua transmissão de uma geração para a outra. A transferência de núcleo é até o momento o único método com potencial para a prevenção da herança dessas patologias, todavia, vários entraves inviabilizam o seu emprego neste sentido. Recentemente nós desenvolvemos uma nova metodologia que possibilita a remoção de mais de 60% das mitocôndrias do oócito/zigoto, o qeu criou novas perspectivas para a transferência de citoplasma como ferramenta para a prevenção da herança de doenças mitocondriais maternas. Se uma grande quantidade de mitocôndrias fosse introduzida no zigoto depletado, o mtDNA mutante seria diluído para um reduzido nível, potencialmente prevenindo a transmissão de muitas patologias causadas pelo mtDNA. Neste contexto, este projeto propõe a investigação de duas metodologias para introdução de uma grande quantidade de mitocôndrias no zigoto depletado e aumentar significativamente nos embriões e nos animais nascidos a contribuição do mtDNA introduzido. Para tanto, será testado o uso de duas fontes de mitocôndrias, i) da fração citoplasmática rica em mitocôndrias obtida pela centrifugação do zigoto (mitocôndrias de origem embrionária), e ii) de mitocôndrias purificadas provenientes de células somáticas (mitocôndrias de origem somática). Será analisado se há efeito da origem das mitocôndrias introduzidas sobre o desenvolvimento a termo bem como a heteroplasmia nos animais nascidos. Caso haja diminuição da heteroplasmia durante o desenvolvimento, outros estudos serão realizados para desvendar os possíveis motivos desta queda. (AU)