MICRORGANISMOS OPORTUNISTAS EM LESÕES DE ESTOMATITE PROTÉTICA E INFLUÊNCIA DA TERAPIA FOTODINÂMICA NOS FATORES DE VIRULÊNCIA DE Candida spp.

Resumo

Os objetivos deste estudo serão isolar e identificar microrganismos oportunistas presentes em lesões de estomatite protética; verificar a produção de fatores de virulência por Candida albicans e Candida dubliniensis; avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica (TFD) em culturas planctônicas e biofilmes formados por C. albicans e C. dubliniensis. Será também avaliada a ação da TFD nos fatores de virulência expressos por tais leveduras. Serão estudados 50 pacientes com estomatite protética e 50 indivíduos sem tais lesões. A coleta de material da cavidade bucal ocorrerá com auxílio de swabs estéreis e através de enxágües bucais. As amostras serão semeadas em ágar seletivos e os microrganismos identificados bioquimicamente pelo sistema API®. Para C. dubliniensis esta identificação também será realizada através da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase. Isolados identificados como C. albicans e C. dubliniensis serão avaliadas quanto à produção dos seguintes fatores de virulência: secreção das enzimas fosfolipase, aspartil-protease, condroitinase, esterase/lípase, hemolisina; hidrofobicidade celular; produção de tubo germinativo; e, formação de biofilme. Os ensaios de TFD serão realizados em culturas planctônicas, e os biofilmes formados no sistema Calgary Biofilm Device (CBD), com as cepas de C. albicans e os isolados de C. dubliniensis que tiverem maior e menor expressão dos fatores de virulência. Como fonte de luz será utilizado o Diodo Emissor de Luz (LED) verde (532±10 nm) com potência de 80 mW e fotossensibilizador eritrosina. Os números de UFC/mL em Log10 serão analisados estatisticamente (p< 0.05). Também será realizada microscopia eletrônica de varredura (MEV) nos discos com biofilmes dos grupos controle e TFD. Após a realização dos ensaios de TFD em culturas planctônicas e biofilmes de C. albicans e C. dubliniensis, serão avaliados novamente a expressão fenotípica dos fatores de virulência nas leveduras remanescentes. (AU)