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Expressao e caracterizacao de um inibidor de agregacao plaquetaria recombinante dos complexos salivares de sanguessugas haementeria depressa.

Processo: 07/58479-9
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de fevereiro de 2008 - 31 de agosto de 2010
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Fernanda Faria
Beneficiário:Fernanda Faria
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Plaquetas sanguíneas  Expressão  Agregação plaquetária 

Resumo

Animais hematófagos possuem em sua saliva substâncias que permitem a fluidez do sangue, para o sucesso de sua alimentação: Com isso, têm sido descritos diversos componentes, com atividades nos diferentes processos hemostáticos (coagulação, fibrinólise e agregação plaquetária). O complexo salivar da sanguessuga H.depressa vem sendo estudado por nosso grupo. Através da bioquímica clássica caracterizamos duas proteínas com interessantes papeis na hemostasia. O Lefaxin é um inibidor da coagulação sangüínea via FXa, sendo capaz de inibi-lo de forma dose dependente com Ki=4nM (FARIA et al, 1999). A Hementerina foi caracterizada como fibrino(geno)litico (CHUDZINSKI-TAVASSI et al, 1998) e posteriormente descrita como um inibidor de agregação plaquetária pela via nitridérgica (CHUDZINSKI-TAVASSI et al, 2003). Mais recentemente, através de análises transcriptômica e proteômica dos complexos salivares desta sanguessuga, determinamos o perfil de transcritos e das proteínas produzidas pelo tecido. Dentre os transcritos mais abundantes detectamos alguns clones similares ao inibidor de agregação plaquetária (LAPP) da sanguessuga H.ofcinallis (FARIA et al, 2005), a produção destes componentes pelo tecido foi confirmada pela análise proteômica (RICCI-SILVA et al, 2005). O LAPP possui cerca de 14kDa e pi de 4 (CONNOLLY et al., 1992) e inibe a ligação da plaqueta ao colágeno tanto pelo epítopo do FvW quanto pelo domínio alfa2-betal (VAN ZANTEN et al., 1995). Assim, no presente projeto, temos como objetivo expressar e caracterizar o clone presente no transcriptoma que apresentou 45% de identidade ao LAPP, para estudos comparativos com esta molécula. (AU)

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