Purificacao e caracterizacao da enterotoxina (ent-ac) termo-estavel produzida por aeromonas caviae, isoladas em surto de diarreia aguda em criancas

Resumo

Bactérias do gênero Aeromonas encontram-se amplamente distribuídas na natureza, e estão associados a patologias em répteis e peixes, assim como em casos de patologias humanas, tanto intestinais quanto extra intestinais. Após a década de 90 do século XX, bactérias do gênero Aeromonas, principalmente as espécies A. hydrophila, A. veronii biovar sóbria e A. caviae, passaram a ser consideradas pela Organização Mundial da Saúde (OMS), como entre os cinco mais freqüentes agentes diarreiogênicos humanos. Entre várias propriedades de virulência de Aeromonas, uma ß-hemolisina com atividade enterotóxica, denominada aerolisina é o principal fator de virulência de A. hydrophila e A. veronii biovar sóbria em infecções intestinais. No entanto, ainda não se conhece um determinante da virulência em A. caviae. Recentemente, através de um estudo das propriedades da virulência de amostras de A. caviae, isoladas de crianças apresentando fezes diarréicas, ocorrida durante um surto no Estado de Pernambuco, detectamos a presença de atividade enterotóxica nos sobrenadantes das culturas desta espécie, através do teste em camundongos recém-nascidos (teste de Dean) e atividade citotóxica em células Vero e Caco-2. Essas atividades enterotóxica e citotóxica apresentaram-se resistentes ao tratamento térmico de 100°C por 30 minutos. Ensaios de ultrafiltração com diversos cortes em diferentes faixas de peso molecular demonstraram que a atividade biológica encontra-se na fração menor que 10kDa. O presente projeto pretende, portanto, purificar e caracterizar química, biológica e sorologicamente, assim como sequênciar esta enterotoxina citotóxica (Ent-Ac) termo-estável produzida por A. caviae, com o objetivo principal de compreender seu papel nos processos de diarreiogenese humana. (AU)