Analise da funcao do sistema de dois componentes vicrk na biologia de streptococcus sanguinis.

Resumo

Streptococcus sanguinis são colonizadores pioneiros das superfícies dentárias reconhecidos como microrganismos comensais benéficos da cavidade bucal, pois expressam diversas funções que inibem o crescimento de espécies patogênicas do biofilme dental. S. sanguinis estão entre as espécies mais comumente envolvidas no estabelecimento de endocardites bacterianas. O genoma de S. sanguinis inclui um vasto grupo de genes que codificam adesinas e proteínas de superfície e o que pode explicar, em parte, o papel desta espécie como potente colonizador primário dos dentes e como patógeno oportunista da endocardite bacteriana. Em ambas as situações, estes microrganismos devem ser capazes de se estabelecer em biofilmes, de responder e se adaptar a condições de estresse ambiental promovidas pela ação da comunidade microbiana e/ou da resposta do hospedeiro. A resposta bacteriana a condições de estresse ambiental é regulada por sistemas reguladores globais de transcrição de dois componentes (SDC). Análises do genoma de S. sanguinis SK36 revelaram a presença de 14 destes sistemas. Através de análises de BLAST, identificamos que um destes SDC é altamente homólogo ao sistema VicRK (vicde virulence control), o qual regula diversos genes envolvidos na virulência de espécies patogênicas, como Streptococcus mutans e Streptococcus pneumoniae. O objetivo deste projeto é caracterizar a função do sistema VicRK na biologia de S. sanguinis, através da construção de mutantes vicK a partir das cepas SK36 e DSS-10. Diversas características fenotípicas e genéticas possivelmente associadas à virulência serão então comparadas entre os mutantes e as respectivas cepas selvagens. Estas características serão determinadas em análises de morfologia, do crescimento planctônico, formação de biofilmes, competência, resistência a antibióticos e sensibilidade ao estresse oxidativo. Também serão analisados os padrões de expressão de possíveis genes de virulência identificados no genoma de S. sanguinis, cujos ortólogos são regulados pelo sistema VicRK em S. mutans e S. pneumoniae. Estes genes codificam proteínas de superfície relacionadas à síntese de matriz extracelular, manutenção do envelope celular e competência (gtfB, ssapcsB, ssa0094, ssa1543 e comE). (AU)