Pesquisa do Helicobacter pylori em tecido hepático fixado e emblocado de pacientes com carcinoma hepatocelular

Resumo

O carcinoma hepatocelular (CHC) é uma das doenças mais comuns na população humana mundial resultando na morte de 250.000 a 1 milhão de indivíduos anualmente. Pesquisadores têm relatado o papel da infecção pelo Helicobacter (H.) pylori no desenvolvimento do CHC. O H. pylori é uma bactéria que coloniza a mucosa gástrica humana e considerada carcinógeno tipo I devido à sua associação com o carcinoma gástrico e linfoma tipo MALT. Estudos demonstram a presença do H. pylori em amostras de bile, tecido da vesícula e tecido hepático de pacientes com colecistite crônica, colangite esclerosante, hepatite crônica, cirrose e CHC. Diante desses achados e considerando que o CHC é um importante problema de saúde pública mundial, o objetivo do presente estudo é detectar, amplificar e sequenciar o DNA do H. pylori em amostras de tecido hepático de pacientes com CHC. Para isso, serão estudadas 45 amostras de tecido hepático fixado e emblocado divididas em dois grupos: Grupo A (GA): composto por 30 amostras de tecido hepático tumoral e peritumoral de pacientes com CHC e Grupo B (GB): composto por 15 amostras de tecido hepático de pacientes com doenças hepáticas não neoplásicas (grupo controle). As amostras serão submetidas à reação em cadeia da polimerase realizada em duas etapas: na primeira será utilizado um par de primers específico para o gene 16SrRNA do gênero Helicobacter. Quando o resultado desta etapa for positivo, os amplicons serão submetidos à segunda reação com primers específicos para amplificação do gene da proteína 26kDa do H. pylori. A análise das sequências de DNA será realizada no sequenciador ABI310 (Applied Biosystems). A análise dos dados será realizada através do Teste do Qui-quadrado e do Teste Exato de Fisher sendo considerados estatisticamente significantes os valores de pd0.05. (AU)