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Estudo da efetividade da terapia fotodinâmica antimicrobiana na inativação de espécies de Candida e do dano celular causado nas células fúngicas: avaliação in vitro e in vivo de dois fotossensibilizadores

Resumo

Este projeto de pesquisa contará com a realização de três estudos, nos quais serão avaliados os fotossensibilizadores (FS) Photodithazine (PDZ) e Curcumina, associados à luz do tipo LED. No Estudo I, serão selecionados 10 isolados clínicos das espécies C. albicans, C. glabrata e C. tropicalis. Alíquotas das suspensões celulares das três espécies serão transferidas para placas de 96 orifícios, tratadas com três concentrações dos FSs (10; 25 e 50 mg/L) e expostas a três doses de luz (18; 25,5 e 37,5 J/cm2). Suspensões adicionais serão tratadas somente com os FSs ou apenas iluminadas. Serão obtidas diluições seriadas de cada amostra (10-1 a 10-3), e alíquotas de 25 µL dessas diluições serão plaqueadas em SDA. Após a incubação (37ºC; 48 horas), será realizada a contagem das colônias viáveis (ufc/mL), e os valores obtidos serão analisados com o teste estatístico mais adequado. No Estudo II serão utilizadas cepas de referência de C. albicans, C. glabrata e C. tropicalis. Suspensões celulares de cada espécie serão submetidas à Terapia Fotodinâmica (PDT) por meio da variação do tipo de FS (PDZ e Curcumina), concentração do FS (10, 25 e 50 mg/L) e dose de luz (37,5; 25,5 e 18,0 J/cm2). Em seguida, as suspensões serão submetidas à contagem das colônias viáveis, análise quantitativa MTT, quantificação da liberação de proteínas totais, liberação de desidrogenase láctica, liberação da fosfatase alcalina e avaliação biomolecular de danos ao núcleo da célula. Os resultados obtidos para as suspensões controle e experimental em cada análise serão comparados pelo método estatístico apropriado. No Estudo III, camundongos portadores de candidose induzida no dorso da língua serão submetidos à PDT, mediada pelos FSs PDZ e Curcumina. Após três dias da inoculação, os animais serão submetidos à PDT, tratados somente com FS, tratados somente com luz ou não receberão nenhum tratamento (n=5 cada grupo). Em seguida, será realizada recuperação de C. albicans da língua dos animais por meio da coleta com swabs, semeadura em SDA, incubação, e contagem de colônias viáveis. Os camundongos serão sacrificados para remoção da língua e posterior análise histológica. Os resultados serão analisados método estatístico apropriado. (AU)

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Publicações científicas (8)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ANDRADE, MARIANA CARVALHO; DIAS RIBEIRO, ANA PAULA; DOVIGO, LIVIA NORDI; BRUNETTI, IGUATEMY LOURENCO; GIAMPAOLO, EUNICE TERESINHA; BAGNATO, VANDERLEI SALVADOR; PAVARINA, ANA CLAUDIA. Effect of different pre-irradiation times on curcumin-mediated photodynamic therapy against planktonic cultures and biofilms of Candida spp. ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY, v. 58, n. 2, p. 200-210, . (08/03994-9)
DOVIGO, LIVIA N.; PAVARINA, ANA CLAUDIA; RIBEIRO, ANA PAULA D.; BRUNETTI, IGUATEMY L.; COSTA, CARLOS ALBERTO DE S.; JACOMASSI, DENIS P.; BAGNATO, VANDERLEI S.; KURACHI, CRISTINA. Investigation of the Photodynamic Effects of Curcumin Against Candida albicans. Photochemistry and Photobiology, v. 87, n. 4, p. 895-903, . (98/14270-8, 08/00601-6, 08/03994-9)
DOVIGO, L. N.; CARMELLO, J. C.; CARVALHO, M. T.; MIMA, E. G.; VERGANI, C. E.; BAGNATO, V. S.; PAVARINA, A. C.. Photodynamic inactivation of clinical isolates of Candida using Photodithazine (R). BIOFOULING, v. 29, n. 9, p. 1057-1067, . (98/14270-8, 08/00601-6, 08/03994-9)
DOVIGO, LIVIA NORDI; CARMELLO, JULIANA CABRINI; DE SOUZA COSTA, CARLOS ALBERTO; VERGANI, CARLOS EDUARDO; BRUNETTI, IGUATEMY LOURENCO; BAGNATO, VANDERLEI SALVADOR; PAVARINA, ANA CLAUDIA. Curcumin-mediated photodynamic inactivation of Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. Medical Mycology, v. 51, n. 3, p. 243-251, . (08/00601-6, 08/03994-9)
CARMELLO, J. C.; DOVIGO, L. N.; MIMA, E. G.; JORGE, J. H.; DE SOUZA COSTA, C. A.; BAGNATO, V. S.; PAVARINA, A. C.. In vivo evaluation of photodynamic inactivation using Photodithazine (R) against Candida albicans. PHOTOCHEMICAL & PHOTOBIOLOGICAL SCIENCES, v. 14, n. 7, p. 1319-1328, . (08/03994-9, 08/00601-6, 13/07276-1)
DIAS RIBEIRO, ANA PAULA; PAVARINA, ANA CLAUDIA; DOVIGO, LIVIA NORDI; BRUNETTI, IGUATEMY LOURENCO; BAGNATO, VANDERLEI SALVADOR; VERGANI, CARLOS EDUARDO; DE SOUZA COSTA, CARLOS ALBERTO. Phototoxic effect of curcumin on methicillin-resistant Staphylococcus aureus and L929 fibroblasts. Lasers in Medical Science, v. 28, n. 2, p. 391-398, . (10/05425-1, 08/03994-9)
DIAS RIBEIRO, ANA PAULA; ANDRADE, MARIANA CARVALHO; DA SILVA, JULHIANY DE FATIMA; JORGE, JANAINA HABIB; PRIMO, FERNANDO LUCAS; TEDESCO, ANTONIO CLAUDIO; PAVARINA, ANA CLAUDIA. Photodynamic Inactivation of Planktonic Cultures and Biofilms of Candida albicans Mediated by Aluminum-Chloride-Phthalocyanine Entrapped in Nanoemulsions. Photochemistry and Photobiology, v. 89, n. 1, p. 111-119, . (08/03994-9, 10/05425-1)
DOVIGO, LIVIA N.; PAVARINA, ANA C.; CARMELLO, JULIANA C.; MACHADO, ANA L.; BRUNETTI, IGUATEMY L.; BAGNATO, VANDERLEI S.. Susceptibility of Clinical Isolates of Candida to Photodynamic Effects of Curcumin. Lasers in Surgery and Medicine, v. 43, n. 9, p. 927-934, . (08/00601-6, 08/03994-9)

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