Identificação molecular de genes de resistência codificadores de ESBL, detectados em cepas clínicas de Enterobacteriaceae relacionadas a infecções hospitalares

Resumo

As beta-lactamases de espectro estendido (ESBL) são reconhecidas mundialmente como um problema de saúde pública, especialmente no ambiente hospitalar, por conferirem resistência à maioria das cefalosporinas e ao aztreonam. Atualmente há mais de 300 enzimas descritas, e seu amplo espectro de ação elimina opções importantes da terapia antimicrobiana de infecções. São codificadas por genes denominados bla, e os principais grupos de ESBL são TEM, SHV e CTX-M, sendo que outros grupos mais raros têm emergido na América Latina e no Brasil. Justificativa. As enzimas ESBL e seus genes possuem ampla distribuição, e estes são facilmente transferidos entre cepas bacterianas por meio de elementos móveis. Após a identificação de genes inéditos no Brasil em uma das cepas pertencentes a um estudo anterior deste grupo de pesquisa, notou-se a importância de identificar os genes detectados nas demais cepas do estudo. Objetivo. Identificar, por meio de sequenciamento genético, genes bla detectados previamente em cepas clínicas produtoras de ESBL dos grupos TEM, SHV, CTX-M, GES, VEB e PER-2. Material e Métodos. 130 cepas da família Enterobacteriaceae produtoras de ESBL serão estudadas. Será realizada a extração de DNA total por meio de choque térmico, o qual será submetido à PCR específica para os grupos de ESBL. Os fragmentos amplificados serão purificados e sequenciados. As sequências de nucleotídeos serão alinhadas e analisadas no programa Bioedit, e os resultados conferidos na base de dados BLAST do GeneBank. Resultados Esperados. Pretende-se, com o estudo proposto, determinar a classificação dos genes de resistência obtidos na triagem por PCR e assim discutir a importância para a Saúde Pública da presença desses genes em amostras clínicas e sua possível origem. (AU)