Efeito do tratamento com progesterona e do diâmetro do folículo ovulatório na expressão gênica e concentração de receptores endometriais de ocitocina, estradiol e progesterona antes e após a indução da ovulação em vacas Nelore em anestro

Resumo

A hipótese do Experimento 1 é que vacas em anestro apresentam baixa expressão gênica e concentração de receptores endometriais de P4 (rP) e que a queda nas concentrações plasmáticas de P4 observada após o tratamento com P4 exógena eleva a expressão gênica e a concentração desses receptores. Hipotetiza-se também, que a expressão gênica e as concentrações endometriais dos receptores de estradiol-a (rEα) e ocitocina (rOT) são inversamente proporcionais às dos rP. Vacas Nelore em anestro (n=40) serão induzidas a ovular (GnRH no dia 0) com (n=20) ou sem (n=20) pré-tratamento com P4 por 6 dias (dias -8 a -2). Amostras de sangue serão colhidas para se determinar as concentrações séricas de P4 nos dias -2 e O. Biópsias endometriais serão realizadas nos dias -8, -2, 0 e 5. Para cada dia de biópsia serão escolhidas aleatoriamente 5 vacas de cada grupo. A hipótese do Experimento 2 é que o estímulo à expressão dos rP causado pela queda nas concentrações plasmáticas de P4 não ocorre quando os níveis pré-ovulatórios de estradiol (E2) são baixos. Vacas Nelore em anestro (n=40) receberão pré-tratamento com progesterona por 5 dias (entre os dias -7 e -2) e serão induzidas a ovular (injeção de GnRH no dia 0) folículos de diferentes diâmetros. Para isso, as vacas do Grupo Fol-Pequeno (n=20) e do Grupo Fol-Grande (n=20) serão submetidas a aspiração dos folículos = 6 mm nos dias -5 e -7, respectivamente. Amostras de sangue serão colhidas para se determinar as concentrações séricas de E2 no dia 0. Biópsias endometriais serão realizadas nos dias -7, -2, 0 e 5. Para cada dia de biópsia serão escolhidas aleatoriamente 5 vacas de cada grupo. Em ambos experimentos, a expressão gênica de rP, rEa e rOT será determinada por RT-PCR em tempo real. As concentrações de rP e rEα serão determinadas por imunohistoquímica e as concentrações de rOT serão determinadas por ensaio de saturação de ligação específica (ensaio de "binding"). Serão comparadas também as características histológicas do endométrio entre os tratamentos, através de lâminas histológicas (HE). Os dados serão analisados por análise de variância, através do PROC GLM do SAS. (AU)