Expressão da metalo-protease-1, da metalo-protease-9 e do colágeno tipo IV, em córnea de coelhos tratados topicamente com sulfato de morfina a 0,5% após ceratectomia lamelar

Resumo

Propõe-se estudar os efeitos do sulfato de morfina à 0,5% sobre a reparação corneal, avaliando-se a expressão das metalo-proteases-1, -9, e do colágeno tipo IV, em coelhos submetidos a ceratectomia lamelar. Vinte e oito animais hígidos machos serão empregados na pesquisa. Formar-se-ão dois grupos (n=14). O primeiro (morfina GM) receberá 100µ de morfina à 0,5%, a cada 4 horas, totalizando 4 aplicações diárias até a reepitelização das córneas. O segundo (controle-GC) receberá solução fisiológica nas mesmas condições adotadas para o GM. Avaliação clínica diária com biomicroscópio em lâmpada de fenda e teste da fluoresceina serão realizados até a reepitelização das córneas. O limiar de sensibilidade corneal será avaliado por estesiometria antes e posteriormente ao procedimento cirúrgico (1 minuto antes e 10 minutos após cada tratamento). Diariamente, durante sete dias, dois animais de cada grupo serão submetidos à eutanásia ativa e terão seus olhos colhidos. As córneas serão dissecadas do bulbo do olho, acondicionadas em meio de OCT, submetidas a congelamento à -70° C e processadas para estudo à imunoistoquímica pela técnica de estreptoavidina-biotina-peroxidase, visando-se a avaliar a expressão da MMP-1, da MMP-9 e do colágeno tipo IV. Adicionalmente, microscopia de luz valendo-se das colorações hematoxilina e eosina e tricômio Masson serão realizadas. O percentil de células coradas nos olhos tratados e controles será avaliado ao teste chi-quadrado. Empregar-se-á o teste-t Student pareado será empregado para se compararem os valores obtidos pelo sistema de marcação, pelo escore padronizado e para se avaliar o limiar de sensibilidade corneal, considerando significativos os valores de p abaixo de 0,05. (AU)