Combinacoes estrategicas entre os promotores virais e transgenes destinadas a terapia genica do cancer.

Resumo

Câncer é uma doença devastadora e os tratamentos tradicionais com freqüência não são suficientes para induzir regressão tumoral. A terapia gênica é uma modalidade terapêutica experimental indicada como uma promissora alternativa para o tratamento de câncer. Nosso laboratório (Setor de Vetores Virais, SVV, InCor, FM-USP) vem desenvolvendo novos vetores virais para eventual aplicação em terapia gênica do câncer. Nosso interesse está centrado no aprimoramento da expressão viral e estrategicamente combinar o sistema de expressão viral com a atividade do gene terapêutico. Recentemente, nós construímos o vetor adenoviral AdPG com expressão dirigida pelo fator de transcrição e supressor de tumor, p53. A utilização da configuração PG como promotor de expressão viral é fruto de trabalhos prévios de nosso laboratório onde demonstramos a funcionalidade e versatilidade da incorporação do promotor PG em vetores virais. Apresentaremos neste projeto duas propostas experimentais para avaliação do vírus AdGP como veículo de transferência de genes supressores de tumor. No primeiro objetivo, os genes terapêuticos p53 e p14Arf serão inseridos no vetor AdPG. A atividade combinada de p53 e p14Arf oferece benefícios tanto para a expressão viral quanto para o efeito anti-tumoral. Carcinoma da próstata foi escolhido como modelo para demonstrar a eficiência dos vírus AdPGp53IRESp14Arf. No segundo objetivo, nós pretendemos utilizar o vetor AdPG para introduzir o gene pro-apoptótico p53 e o gene imuno-estimulador interferon-ß em células tumorais. Nosso intuito é inibir simultaneamente o crescimento do tumor primário e o aparecimento de metástases, respectivamente mediados pelos genes p53 e IFNß. Também inserido na linha de desenvolvimento de vetores virais com expressão direcionada para células tumorais é o nosso terceiro objetivo. Aqui estamos propondo a criação de vetores derivados de vírus adenoassociado (AVV) contendo o promotor gênico de E2F-1. Os vetores AVVE2F serão utilizados para veicular a expressão do gene suicida HSV-tk. Nós acreditamos que este novo vetor pode trazer benefícios terapêuticos acompanhado de segura aplicação de AVV. A expressão do gene suicida HSV-tk sob controle do promotor de E2F restringe a ação do vírus terapêutico para apenas as células em divisão, como células tumorais. Com o sucesso deste projeto, nós teremos três novas estratégias para a eventual aplicação em terapia gênica do câncer. (AU)