Metabolismo do glicerol nos tecidos adiposos branco e marrom

Resumo

Dando prosseguimento a estudos anteriores, os experimentos propostos no projeto têm por objetivo investigar nos tecidos adiposos branco (TAB) e marrom (TAM) aspectos do metabolismo do glicerol ligados à produção de glicerol-3-fosfato. No TAB será investigado o controle da gliceroneogênese. Especificamente, serão investigados: 1. o efeito da inibição da captação de ácidos graxos (AG) circulantes sobre a síntese de glicerol de triacilglicerois (glicerol-TAG), in vivo, e o efeito desses inibidores sobre a atividade da fosfoenolpiruvato carboxiquinase (PEPCK) e sobre a capacidade do TAB incorporar piruvato-1-14C em glicerol-TAG 2. o efeito da adição de AG de cadeia longa sobre esses mesmos processos em fragmentos incubados de TAB, na presença ou não de inibidores da síntese proteica, e 3. dependendo dos resultados obtidos, investigar o efeito dos AG sobre a concentração de acil-CoA e dos níveis de mRNA para PEPCK deste tecido. No TAM será investigada a utilização de glicerol já formado (reciclado a hidrólise de TAG endógeno ou captado da circulação), com enfoque na atividade da gliceroquinase (GK). Especificamente, serão investigadas: 1. a influência de fatores neurais (lesão bilateral e estimulação química de áreas centrais, estimulação elétrica dos nervos simpáticos do tecido) e hormonais/metabólicos (infusão de insulina, glicose, glicerol e noradrenalina, e de agonistas adrenérgicos seletivos) sobre a atividade da GK. 2. a atividade da GK em diferentes condições fisiológicas (exposição ao frio ou administração de dieta hipercalórica, verificando o efeito da hemidesnervação do TAM, da lesão de áreas centrais e da administração de antagonistas adrenérgicos seletivos) 3. verificar, nas situações em que houver alteração da atividade da GK, os níveis de mRNA (Northern blot) e da concentração da enzima (Western blot) 4. verificar, nas mesmas situações, a capacidade do TAM de utilizar glicerol circulante através da infusão contínua de glicerol-14C. (AU)