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Clonagem e caracterização de novos genes humanos relacionados aos genes da proteína do citoesqueleto da espectrina e da família de trocadores de anions

Resumo

Todas as membranas celulares executam funções altamente especializadas. Apesar de todas apresentarem uma estrutura básica de duas camadas de fosfolípides, um conjunto de proteínas de membrana possibilita cada membrana celular realizar diferentes atividades. Estas proteínas são basicamente periféricas, que compõem o citoesqueleto, e integrais, geralmente glicoproteínas com diversas funções. Proteínas do citoesqueleto são constituídas principalmente por membros da família das espectrinas e anquirinas. Vários domínios destas proteínas são formados por repetições de aminoácidos que concedem às proteínas a capacidade de se articular com outras moléculas. Algumas destas repetições de aminoácidos podem ser ainda encontradas em fatores de transcrição que têm o papel de envolver o DNA. Redes proteicas citoesqueléticas estão presentes em várias estruturas intracelulares e têm importância na reciclagem, tráfico e triagem de proteínas a serem exportadas e podem estar envolvidas na transmissão de sinais, no controle do ciclo celular e da transcrição, no desenvolvimento e morfogênese, no transporte de proteínas, em neoplasias, entre outros. A partir destas evidências fica claro que a identificação de novas isoformas das proteínas citoesqueléticas pode ajudar a identificar e caracterizar estas possíveis funções. Por outro lado, uma função importante das proteínas integrais é o transporte de água e íons através das membranas. Os trocadores de anions da membrana podem ainda apresentar domínio citoplasmático capaz de se ligar às proteínas do citoesqueleto. No caso da hemácia, o trocador de ânions do tipo I (AEI ou banda 3) colabora decisivamente na estabilidade e integridade da membrana eritrocitária, além de regular o pH intra-eritrocitário e o pH plasmático. Nos últimos dez anos, o nosso laboratório vem estudando proteínas da membrana eritrocitária através de caracterização de proteínas e genes como espectrina alfa e beta, anquirina e banda 3. Nosso interesse, atualmente, reside em detectar e caracterizar novas proteínas desta família de genes, assim como detectar ínteração destas com outras proteínas. A partir do Projeto Genoma do Câncer, financiado pela FAPESP, selecionamos vários EST com homologia às proteínas mencionadas. Pretendemos extender estas EST, sequenciar os novos genes e caracterizar as proteínas codificadas pelos mesmos. Além disso, através de ensaios duplo-híbridos, pretendemos investigar novas proteínas que tenham interação com as proteínas mencionadas. É nosso objetivo ainda determínar o padrão de expressão destes novos genes nos diferentes tecidos humanos, o que será realizado por Northern Blotting multi-tecidual, e determínar a localização celular das novas proteínas por imunofluorescência. Finalmente, através de microarrays e macroarrays , avaliar o envolvimento destas proteínas na regulação da expressão de outros genes e seu papel em tecidos tumorais. (AU)

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Publicações científicas (7)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE MAGALHÃES SARTIM‚ R.; FANTINATO MENEGON‚ L.; ROBERTA DE ALMEIDA‚ A.; ANTONIO ROCHA GONTIJO‚ J.; ALINE BOER‚ P.. Development of hypertension in a pyelonephritis-induced model: The effect of salt intake and inability of renal sodium handling. RENAL FAILURE, v. 28, n. 6, p. 501-507, . (00/12216-8)
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