Urease: produção de proteína recombinante e desenvolvimento de inibidores para terapia antifúngica contra criptococose

Resumo

Espécies de Cryptococcus são os agentes etiológicos da criptococose, sendo a forma cerebral a mais frequente e grave em pacientes HIV/AIDS, o que impacta em altas taxas de mortalidade e morbidade. Embora haja terapia antifúngica para a criptococose, ainda é pouco efetiva devido a limitada opção de antifúngicos, aos efeitos colaterais, a farmacocinética desfavorável e ao aumento de isolados resistentes aos antifúngicos disponíveis. Dessa forma, nosso grupo de pesquisa tem buscado alternativas para o tratamento da criptococose, sendo uma delas o desenvolvimento de inibidores da enzima urease de Cryptococcus. A urease catalisa a hidrólise da ureia em amônia, que está associada ao aumento da sobrevivência de leveduras dentro dos macrófagos e ao enfraquecimento da barreira hematoencefálica que facilita a entrada do patógeno para o tecido cerebral, passo importante no estabelecimento da meningite criptocócica. Considerando que a urease é naturalmente ausente em humanos, a inibição enzimática pode ser uma estratégia interessante no estudo de agentes anti-Cryptococcus; entretanto, a sua estrutura tridimensional ainda não é conhecida. Dessa forma, este projeto tem como objetivo produzir a urease recombinante de C. neoformans utilizando o sistema de expressão eucariótica com Pichia pastoris para caracterização e elucidação de sua estrutura e desenvolver inibidores potentes para investigar a atividade antifúngica in vitro e in vivo na busca de alternativas terapêuticas para o tratamento da criptococose. (AU)