Desenvolvimento e análise de novos irrigantes e protocolos para emprego em procedimentos de revascularização e regeneração pulpar

Resumo

Procedimentos endodônticos regenerativos são indicados para o tratamento de dentes imaturos necróticos por permitir o desenvolvimento radicular, resultando em aumento do comprimento da raiz, espessura e fechamento apical. Para serem efetivos, a desinfecção do ambiente é um pré-requisito e a eliminação da etapa da instrumentação dificulta o desbridamento que é realizado apenas por soluções químicas. O uso associado de baixas concentrações de hipoclorito de sódio (NaOCl) e ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA) a 17% tem sido recomendado para limpeza e desinfecção de canais de dentes imaturos necróticos. No entanto, estudos demonstram que o NaOCl causa efeitos deletérios às células tronco e à matriz dentinária. Em razão disso, o objetivo desta pesquisa será avaliar, in vitro, o uso do Cloridrato de Ambroxol em diferentes concentrações, sozinho ou associado a diferentes soluções irrigadoras e quando a ativação ultrassônica ou com laser é utilizada, avaliando quanto a: 1) Citotoxicidade, proliferação e vitalidade em células-tronco de papila dental; 2) Ação antimicrobiana e antibiofilme; 3) Os efeitos ultraestruturais na dentina; 4) A capacidade de dissolução tecidual apical. Para todos os testes realizados, os espécimes serão divididos em 13 grupos (G1-G13), em acordo com o protocolo de irrigação e subdivididos de acordo com o método de irrigação (n=3): Irrigação convencional com seringa e agulha (SG1), agitação com ultrassom (SG2), agitação com laser Thera Lase Surgery (SG3). Para os testes de citotoxicidade, proliferação e vitalidade e dissolução tecidual, serão preparados cilindros de dentina radicular para simular canais radiculares de dentes com rizogênese incompleta, os quais serão posicionados em íntimo contato com uma cultura tri-dimensional (3D) das SCAPs ou com tecido muscular bovino, simulando, o ambiente clínico. Para avaliação da capacidade antimicrobiana, 10 caninos bovinos por grupo serão selecionados e preparados para os testes antimicrobiano em túbulos dentinários e antibiofilme de Enterococcus faecalis, Eikenella Corrodens e Streptococcus anginosus. Para avaliar os efeitos ultraestruturais na dentina, um dente prototipado será confeccionado a partir do escaneamento em microtomógrafo computadorizado (micro-CT) e com auxilio de um trefina, um sítio será criado para o encaixe de blocos de dentina bovina. Em seguida, os protocolos de irrigação serão realizados utilizando um sistema fechado e a razão amida III/fosfato e carbonato/fosfato (PO3-)/(CO3-) serão determinadas com a análise FTIR e imagens em microscópio eletrônico de varredura serão feitas. Será aplicado o teste de normalidade de Shapiro-Wilk e depois o teste paramétrico ou não paramétrico, sendo adotado 5% como nível de significância. (AU)