EMU concedido no processo 2022/02823-3: espectrômetro infra-vermelho transformado de Fourier

Resumo

Em estudos prévios em parceria com grupos das Universidade de Birmingham e Manchester, obtivemos importantes resultados em relação ao aumento significativo da velocidade de reação de polimerização e propriedades mecânicas de resinas experimentais. Todavia, as alterações nos sistemas fotoiniciadores também devem contemplar o aumento da biocompatibilidade dos materiais aos tecidos bucais expostos. Diante disso, foram desenvolvidos novos compostos coiniciadores de polimerização de sistemas contendo canforoquinona como fotosenssibilizador. Estes novos agentes têm demonstrado eficiência comparável aos compostos atualmente utilizados, no que se refere à conversão monomérica. No entanto, ainda não há estudos sobre a influência destes compostos nas propriedades de resinas odontológicas, nem dados sobre a compatibilidade destes agentes em relação às células da polpa dental humana (CPDH). Sendo assim, este estudo tem por objetivo avaliar a influência de novos coiniciadores de polimerização nas propriedades físico-químicas e biológicas de sistemas resinosos experimentais. Na parte 1, CPDH serão isoladas da polpa dental de terceiros molares humanos hígidos e os novos coiniciadores SE06, SE09, SE19, SE20 e o amplamente utilizado etil 4-dimetilamino benzoato (EDAB) serão diluídos em dimetilsulfóxido (DMSO) obtendo-se diferentes concentrações (0,5mM, 1mM, 2mM, 4mM). Grupos controle serão estabelecidos (meio de cultura puro e máxima concentração de DMSO utilizada). CPDH (10 x 104 céls. por poço) serão semeadas em placas de 96 poços e incubadas em estufa à 37°C e 5% CO2. As células serão expostas às diferentes concentrações dos coiniciadores e mantidas em meio de cultura por 24 h. Em seguida, o meio de cultura contendo os monômeros será removido e analisado em relação à liberação de citocinas inflamatórias (IL-1b, IL6, IL-8, IL-10, TNF-±). As células serão coletadas, o DNA extraído, tratado com as enzimas MspI e HpaII para avaliação do padrão de regulação epigenética global (LINE-1, DNMTs e TETs) e em genes específicos (citocinas inflamatórias) por PCR em tempo real. O metabolismo mitocondrial (MTT) e a morte celular (citometria de fluxo) também serão avaliados. Para a Parte 2, compósitos experimentais com os coiniciadores (SE06, SE09, SE19 e SE20) combinados à canforoquinona (0,5% CQ) e difeniliodonio hexafluorfosfato (0,5% DFI) serão avaliados. As resinas serão preparadas variando-se a razão iniciador/coiniciadores (1:1 e 1:2). As avaliações do metabolismo mitocondrial das CPDH, morte celular, liberação de citocinas e regulação epigenética dos genes serão realizadas. O grau de conversão dos sistemas resinosos será avaliado por meio de um espectrômetro infra-vermelho transformado de Fourrier (FTIR). Para a Parte 3, uma base monomérica contendo bisfenol A diglicidil metacrilato (BisGMA) 50% e trietilenoglicol dimetacrilato (TEGDMA) 50% será preparada, com 0,5% de CQ e 0,5% de DFI. Os grupos serão estabelecidos de acordo com o coiniciador (SE06, SE09, SE19, SE20, DMAEMA e-EDAB, usado como controle) e concentração dos compostos (1% e 2%) utilizado, estabelecendo-se 12 grupos experimentais. A essas resinas será adicionado 60% em peso de carga de Ba-Al-Si. Após a preparação dos compósitos, o grau de conversão dos sistemas resinosos será avaliado em tempo real através do FTIR. Será analisada a sorção de água e solubilidade será também avaliada. O módulo de elasticidade dos adesivos e a resistência à flexão serão obtidos a partir do teste de flexão de três pontos (25mm comprimento, 2mm largura, 2 mm de espessura). A contração volumétrica dos compósitos será avaliada por meio da técnica do vidro aderido e a tensão de contração será analisada em Máquina Universal de Ensaio. Para todos os estudos, os dados obtidos serão analisados quanto à sua normalidade e homogeneidade, e então o teste estatístico apropriado será aplicado, sendo este paramétrico ou não paramétrico. O nível de significância utilizado será de 5%. (AU)