Análise morfológica, molecular e funcional de vesículas extracelulares presentes no soro fetal bovino sobre o metabolismo lipídico de complexos cumulus-oócito e embriões

Resumo

Embriões bovinos produzidos in vitro (PIV) apresentam alterações morfológicas, moleculares e, principalmente, metabólicas, como o acúmulo lipídico, que leva a menor criotolerância. O soro fetal bovino (SFB) está entre as fontes de macromoléculas mais utilizadas nos meios de cultivos durante a PIV e é considerado um dos principais responsáveis pelo aumento no acúmulo lipídico destas estruturas. Por outro lado, apesar dos efeitos deletérios do SFB, CCOs e embriões cultivados na ausência dessa macromolécula apresentam alterações morfológicas e moleculares que afetam a maturação e o desenvolvimento embrionário inicial. Curiosamente, o SFB possui vesículas extracelulares pequenas (VEs; sfbVEs) que carreiam lipídios, mRNA e miRNAs. Estudos recentes utilizando SFB depletado (SFBd), ou seja, em que a maioria das VEs foi removida, observaram uma melhora na qualidade e criotolerância dos embriões, sugerindo que estas sfbVEs possam ser responsáveis por causar efeitos negativos sobre o metabolismo lipídico em embriões PIV. Por isso, este estudo tem o intuito de investigar o papel das sfbVEs no metabolismo lipídico e no estresse oxidativo de CCOs e embriões bovinos durante as diferentes etapas da PIV. Para tanto, no experimento 1, será investigado o conteúdo de miRNAs, mRNAs e de lipídios das sfbVEs, com o intuito de identificar quais destas moléculas bioativas possam estar envolvidas em causar efeitos negativos sobre os CCOs e os embriões bovinos PIV. A partir disso, no experimento 2 e 3 buscamos compreender quais alterações no metabolismo lipídico e no estresse oxidativo serão causadas nos CCOs e embriões quando estes forem expostos as sfbVEs durante a maturação e cultivo in vitro. Ao final da realização desse projeto, esperamos gerar dados acerca de como o metabolismo lipídico de CCOs e embriões pode ser alterado pelas sfbVEs, podendo contribuir para que a qualidade dos embriões bovinos produzidos por PIV seja melhorada. (AU)