Estudo integrativo de RNAs não codificantes e perfil metabolômico em pacientes obesos: contribuição do mecanismo fisiopatológico para busca de alvos farmacológicos

Resumo

A prevalência da obesidade aumentou em pelo menos três vezes nas últimas três décadas tornando-se um problema muito importante na saúde pública. A obesidade é epidemiologicamente determinada como fator de alto risco para o desenvolvimento de doenças, incluindo as doenças cardiovasculares (DCV). A etiologia multifatorial de complexidade dessas doenças requer a aplicação de uma ferramenta integrativa que interaja com fatores ambientais, estilo de vida e fatores genéticos/epigenéticos no mecanismo fisiopatológico para ter uma nova visão de perspectivas para determinar diagnóstico precoce, classificação de novos biomarcadores e descoberta de alvos potenciais para intervenções terapêuticas. Mecanismos moleculares da obesidade e complicações cardiometabólicas, ainda pouco conhecidos, surgindo a necessidade de novas abordagens de estudo. A análise integrativa de marcadores epigenéticos, como miRNAs e lcnRNAs que interferem no perfil de transcrição e complementados com o perfil metabolômico, pode auxiliar na avaliação da fisiopatologia de diversas doenças complexas e pode descobrir algum biomarcador útil e alvo terapêutico. O objetivo deste estudo é propor uma análise integrativa de alguns sistemas biológicos incluindo mecanismos de regulação transcricional utilizando expressão de miRNA, perfil de lncRNA, mRNA e perfil metabolômico no tecido adiposo visceral (TAV) de indivíduos obesos e controles magros. Determinar também o perfil cardiometabólico (lipídios, metabolismo da glicose, algumas citocinas inflamatórias) e perfil antropométrico com medida do corpo gorduroso total. Além disso, a expressão de miRNA e lncRNA relacionado à obesidade será avaliada em leucócitos periféricos, e o perfil metabolômico e cardiometabólico será avaliado no soro de um grande número de pacientes obesos e controles com o objetivo de propor novos biomarcadores úteis para predizer o risco de complicações cardiovasculares na obesidade. O TAV será obtido de pacientes obesos (IMC>30 Kg/m2) e controles magros (IMC 18-25 Kg/m2) do Centro de Tratamento da Obesidade da Clínica Alemana de Temuco (CTO/CAT, Temuco-Chile) durante um e cirurgia laparoscópica clinicamente indicada (cirurgia bariátrica para pacientes e cálculos biliares para controles). O RNA extraído do TAV será utilizado para avaliar o perfil de miRNA por sequenciamento de próxima geração, perfil de mRNA do metabolismo do colesterol por RT-qPCR, lncRNA relacionado ao metabolismo do colesterol e perfil metabolômico por espectrometria de massa acoplada a UHPLC. Os resultados serão avaliados por bioinformática integrativa e ferramentas de modelagem computacional de aprendizado de máquina para selecionar as principais moléculas relacionadas à obesidade e complicações cardiometabólicas. Estas moléculas serão testadas como biomarcadores em leucócitos periféricos de uma coorte maior de indivíduos obesos (n=125) matriculados no Hospital Real Benemérita Associação Portuguesa (São Paulo, Brasil) e no CTO/CAT-Chile, usando RT-qPCR. A análise metabolômica sérica também será realizada. A identificação das características funcionais será realizada. Ferramentas de bioinformática serão empregadas para identificar potenciais alvos farmacológicos usando modelagem molecular. Os resultados dos mecanismos epigenômicos e metabolômicos contribuirão para o conhecimento das bases moleculares na fisiopatologia da obesidade e suas complicações cardiovasculares. Além disso, na prática clínica, tem potencial aplicação como biomarcadores que podem ser validados como diagnóstico e acompanhamento da terapia e busca de alternativas terapêuticas. (AU)