Design, síntese química e aplicação de fragmentos peptídicos da histatina-5 associados a sistemas lipossomais no combate ao fungo Candida albicans: uma nova alternativa para o tratamento da candidíase oral

Resumo

Atualmente aproximadamente de 75 a 88% das infecções fúngicas são causadas por espécies de Candida. Candida albicans é o principal micro-organismo causador dessas infecções, que podem se iniciar na forma de candidíase oral e, sem o tratamento adequado, evoluir para uma infecção sistêmica de maior gravidade. Esta espécie de fungo já apresenta resistência contra os principais fármacos utilizados para tratamento. Neste caso, os antifúngicos mais comumente utilizados, como polienos (nistatina e anfotericina B) ou azóis (itraconazol, miconazol, fluconazol) não apresentam ação eficaz, o que torna necessária a busca por novas opções de tratamento e por novas moléculas que sejam eficazes no combate a esses micro-organismos. Neste contexto os peptídeos da família das Histatinas, são vistos como moléculas promissoras, principalmente devido a sua forte ação antimicrobiana contra C. albicans. O peptídeo Histatina-5, um peptídeo naturalmente encontrado na saliva humana, no interior das glândulas salivares parótidas, é o antifúngico mais eficaz desta família, no entanto ainda não é utilizado no tratamento clínico. Um dos motivos é sua rápida degradação quando em contato com a saliva humana, devido ação de proteases, além da inativação de seu efeito antimicrobiano devido à interação com enzimas presentes na saliva. Para viabilizar a aplicação clínica deste peptídeo, é importante desenvolver uma forma de melhorar sua ação além de veicular e aplicar este peptídeo nas lesões bucais, de forma que esteja protegido da ação de componentes presentes na saliva humana. Neste sentido, este projeto propõe o design racional e a utilização da técnica de síntese de peptídeos em fase sólida (SPFS) como estratégia para a produção de peptídeos análogos à Histatina-5 que apresentem melhor ação antifúngica e degradação mais lenta em contato com a saliva. Além disso, é proposto o desenvolvimento de lipossomas incorporados com estes peptídeos com objetivo de protegê-los da degradação e inativação de suas atividades antimicrobianas, causadas por elementos presentes no ambiente bucal. Os lipossomas serão produzidos pelas técnicas de sonicação e caracterizados por distribuição de tamanho, índice de polidispersividade e potencial zeta utilizando técnica de espalhamento de luz (light scattering), bem como analisado por microscopia eletrônica de transmissão. Serão realizados estudos de eficiência de encapsulação dos peptídeos nos lipossomas e será avaliada a estabilidade de cada sistema. Serão realizados ensaios de cinética de morte celular para C. albicans e análise da degradação dos peptídeos encapsulados em lipossomas em saliva humana. Pretende-se, ao final do projeto, obter um sistema lipossomal que proporcione aumento do tempo de permanência dos peptídeos no local de ação e uma certa proteção contra degradação proteolítica, permitindo uma melhora na ação antifúngica dos peptídeos antimicrobianos (PAMs) derivados de Histatina-5, resultando em uma alternativa para o tratamento da candidíase oral. (AU)