Em busca da diversidade de Bartonella spp. em mamíferos, aves e dípteros hematófagos no Brasil

Resumo

O gênero Bartonella (Rhizobiales; Bartonellaceae) engloba bactérias Gram-negativas intracelulares facultativas que parasitam principalmente eritrócitos e células endoteliais de mamíferos, podendo causar zoonoses com manifestações clínicas com magnitude variando de moderada a grave, a depender da espécie de Bartonella envolvida e status imune do hospedeiro mamífero. Gatos, roedores e morcegos atuam como reservatórios de uma grande diversidade de espécies de Bartonella, muitas das quais zoonóticas. Apesar disto, a diversidade genética de Bartonella spp. em morcegos no Brasil ainda é pouco estudada. Da mesma forma, apenas um estudo até o momento objetivou a genotipagem de isolados de B. henselae a partir de amostras de sangue de gatos no Brasil, mostrando a ocorrência das Sequence Types (ST) 9 e 37 em gatos nos estados de São Paulo e Minas Gerais, respectivamente. No que diz respeito à ocorrência e diversidade de Bartonella spp. que infectam cães no Brasil, os estudos são ainda mais escassos. Inexistentes são os estudos acerca da ocorrência de Bartonella spp. em aves selvagens no Brasil. Embora sejam principalmente transmitidas por vetores artrópodes hematófagos (pulgas, carrapatos, mosquitos, moscas e piolhos), a relação entre este grupo de bactérias e dípteros hematófagos é pouco estudada. Embora dípteros do gênero Lutzomyia sejam os principais vetores de Bartonella bacilliformis no Peru, inexistentes são os estudos acerca da ocorrência e identidade molecular deste grupo de bactérias em flebotomíneos no Brasil, que alberga uma enorme diversidade de dípteros Psychodidae do mundo. Adicionalmente, a transfusão de sangue a partir de doadores infectados e assintomáticos configura uma possível e negligenciada forma de transmissão destes agentes. O presente estudo objetiva investigar a diversidade genética de Bartonella spp. em amostras de sangue ou baço de cães, gatos, quirópteros, aves selvagens e em espécimes de dípteros Psychodidae e Ceratopogonidae no Brasil. Amostras de sangue de cães (n=200) e gatos (n=200) submetidas a exames de rotina de patologia clínica e de doadores de sangue no Distrito Federal serão submetidas à cultura para Bartonella spp. utilizando abordagem que combina enriquecimento em meio líquido BAPGM (Bartonella Alpha Proteobacteria Growth Medium) e isolamento em ágar chocolate, seguida de ensaios de PCR em tempo real (qPCR) e convencional (PCR) para Bartonella spp. baseados em inúmeros marcadores moleculares. Isolados de B. henselae de amostras de sangue de cães e gatos serão genotipados pela técnica de Multilocus Sequence Typing (MLST). Amostras de sangue de cães e gatos do Distrito Federal, aves (n=817) do Pantanal mato-grossense e sul-matogrossense, amostras de baço de morcegos dos estados do Acre (n=353) e Pará (n=229), e amostras de dípteros Psychodidae (n=976) e Ceratopogonidae (n=300) de diversos estados das regiões Norte e Nordeste do país serão submetidas à extração de DNA e ensaios de qPCR e PCR para Bartonella spp. baseados em diversos alvos gênicos, seguidos de sequenciamento pelo Método de Sanger e inferências filogenéticas. A presente proposta contribuirá para o entendimento da diversidade genética de Bartonella spp. em cães, gatos, morcegos, aves selvagens e dípteros Psychodidae e Ceratopogonidae no Brasil. (AU)