Avaliação Morfo-funcional do PPARG e IL7 como moléculas-chave para alterações glicêmicas e imunológicas do Diabetes Mellitus tipo 2 e periodontite

Resumo

Tem sido cada vez mais frequente encontrar pacientes afetados pela combinação de Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2), Dislipidemia e Periodontite(P). Também tem aumentado evidências na literatura demonstrando interações entre DM2, dislipidemia, disfunção do sistema imune e Periodontite. Para o melhor entendimento de tais interações, estudos com modelos animais, principalmente murinos, têm sido valiosos. No entanto, mais estudos clínicos com pacientes, quanto com modelos murinos são necessários para se conhecer moléculas com papel-chave na interação entre o metabolismo glicêmico e lipídico e o sistema imune, além de compreender melhor a interação entre saúde oral e sistêmica do indivíduo. É conhecida a atuação do Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma Gama (PPARG) na regulação do metabolismo glicêmico, lipídico e do sistema imune, bem como da Interleucina 7 (IL-7) no sistema imune, mas são poucos os estudos que investigam a ação combinada destas moléculas na modulação do DM2 e Periodontite. Indicativos da literatura e de nossos resultados anteriores (com pacientes) embasam nossa hipótese que PPARG e IL-7, por meio de TNFA sejam moléculas-chave para essas patologias. O objetivo geral deste estudo é realizar a avaliação morfo-funcional do PPARG e IL-7 como moléculas-chave para alterações glicêmicas e imunológicas do DM2 e Periodontite, ocorrendo como comorbidades, ou isoladamente. Para isso, estabelecemos o Objetivo 1, com enfoque em Estudo Clínico com pacientes, e o Objetivo 2 com enfoque em Estudo Pré-Clinico com Modelo Murino, para permitir superação de limitações de cada desenho experimental. Metodologia Estudo Clínico: 30 indivíduos em cada grupo: DM2, Periodontite, DM2_Compensado+P, DM2_Descompensado+P, e Controle, terão seu perfil glicêmico, lipídico e periodontal examinado antes e depois (45, 90 e 180 dias) de finalizado o tratamento periodontal. Os pacientes dos grupos Periodontite e DM2+P receberão tratamento periodontal não cirúrgico/ cirúrgico (seguindo critérios da literatura sobre o tema), e os indivíduos dos grupos Controle e DM2 receberão profilaxia e reforço da instrução de higiene oral (mesmos períodos). Metodologia Modelo Murino: 40 camundongos C57BL/6J machos serão avaliados em cada grupo: DM, Periodontite, DM+P, e Controle. DM será induzido pela combinação de dieta hiperlipídica e injeção de estreptozotocina; e a Periodontite será induzida pela combinação de ligadura e infecção por Porphyromonas gingivalis. Dez animais em cada grupo serão eutanasiados nos períodos Zero, 7, 14 e 21 dias do tratamento. Como principal desfecho do estudo clínico com pacientes será avaliado em todos os grupos e períodos o comportamento das moléculas-chave PPARG e IL-7, além de TNFA, TGFB1 e IL-10 por quantificação em fluido sulcular gengival (níveis traducionais no periodonto). Também pretende-se investigar níveis transcricionais sistêmicos (RNAm leucócitos humano e murino), traducionais sistêmicos (Multiplex soro humano e murino) dessas moléculas. Dos pacientes que tiverem indicação de tratamento que for possível obter tecido gengival, como análise complementar qualitativa pretende-se realizar: avaliação histológica, estereométrica e imuno-histoquímica (IHQ). O principal desfecho do estudo pré-clínico será a perda óssea periodontal nos animais (avaliada por micro-CT) e análises IHQ. Serão realizadas regressões logísticas lineares e/ou múltiplas, análises de correlação, dos níveis transcricionais e traducionais dessas moléculas em função dos perfis glicêmico, lipídico e periodontal, comparando os grupos nos diferentes períodos. Por meio deste estudo clínico, complementado pelo pré-clínico com modelo murino, aprofundaremos a compreensão da interação patogenética entre DM2 e Periodontite. Isso contribuirá para a biotecnologia na identificação de biomarcadores para diagnóstico e acompanhamento clínico dos pacientes. (AU)