Encephalitozoon cuniculi utiliza a eferocitose para evadir da resposta imune

Resumo

Microsporidia são reconhecidos como patógenos oportunistas em indivíduos com imunodeficiências, especialmente relacionadas às células T. Embora a atividade dos linfócitos T CD8 seja essencial para a eliminação desses patógenos, estudos anteriores demonstraram participação significativa de macrófagos para conter o início da infecção. Os macrófagos e outras células da imunidade inata desempenham um papel crítico na ativação da imunidade adquirida. Após a morte celular programada, os fragmentos celulares ou corpos apoptóticos são eliminados pelas células fagocíticas, fenômeno conhecido como eferocitose. Este processo foi reconhecido como uma forma de evasão da imunidade por patógenos intracelulares. O presente estudo avaliou o impacto da eferocitose de células apoptóticas infectadas ou não em macrófagos e, posteriormente, desafiadas com microsporídios Encephalitozoon cuniculi. Os macrófagos foram obtidos a partir de monócitos da medula óssea de camundongos C57BL, pré-incubados com células Jurkat apoptóticas (ACs), e foram posteriormente desafiados com esporos de E. cuniculi. Os mesmos procedimentos foram realizados usando células Jurkat (IACs) previamente infectadas e desafiadas com esporos de E. cuniculi antes da pré-incubação dos macrófagos. O número médio de esporos internalizados por macrófagos na fagocitose foi contado. A expressão dos macrófagos de CD40, CD206, CD80, CD86 e MHCII, bem como das citocinas liberadas nos sobrenadantes da cultura, foi medida por citometria de fluxo. O estudo ultraestrutural foi realizado para analisar os tipos de multiplicação dos patógenos. Macrófagos pré-incubados com ACs e desafiados com E. cuniculi apresentaram maior porcentagem de fagocitose e número médio de esporos internalizados. Além disso, foi observada a presença de estágios de multiplicação do patógeno no interior dos macrófagos, principalmente após eferocitose de corpos apoptóticos infectados. Além disso, a pré-incubação com ACs ou IACs e / ou desafio com o patógeno diminuiu a viabilidade dos macrófagos, refletida em altas porcentagens de apoptose. A expressão marcante de CD206 e a liberação de grandes quantidades de IL-10 e IL-6 indicaram a polarização dos macrófagos para um perfil M2, compatível com eferocitose e favorável ao desenvolvimento do patógeno. Concluímos que o patógeno favoreceu a eferocitose e polarizou os macrófagos para um perfil M2, permitindo a sobrevivência e multiplicação de E. cuniculi dentro dos macrófagos e explicando a possibilidade de macrófagos atuarem como cavalos de Tróia na microsporidiose (AU)