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Construção da biblioteca de fragmento Fab anti-SARS-CoV-2 de pacientes convalescentes e seleção de anticorpos humanos para COVID-19

Resumo

A infecção coronavirus disease 2019 (COVID-19), causada pelo vírus da síndrome respiratória aguda grave coronavírus 2 (SARS-CoV-2), surgiu em dezembro de 2019 e atualmente representa um grande desafio para a comunidade médica e científica, que está engajada em elucidar a doença e em busca de tratamentos e vacinas eficazes para conter a pandemia. O uso de anticorpos específicos contra agentes infecciosos é uma estratégia aplicada com sucesso desde o final do século XIX para combater doenças infecciosas. Com o desenvolvimento de técnicas para a obtenção de anticorpos monoclonais recombinantes, foi possível a seleção de anticorpos mais específicos para o agente responsável pela doença. Entre estas técnicas podemos destacar a tecnologia de phage display, que é baseada na seleção de anticorpos contra alvos definidos utilizando uma biblioteca de genes de anticorpos, que são apresentadas por bacteriófagos. O presente projeto tem como objetivo construir uma biblioteca imune anti-SARS-CoV-2, que será formada por genes de anticorpos humanos obtidos a partir do RNA das células mononucleares de pacientes convalescentes da COVID-19. Esta biblioteca imune será desafiada contra o fragmento receptor binding domain (RBD) da proteína spike de SARS-CoV-2, uma vez que é a região responsável pelo contato do vírus com a célula hospedeira. Rodadas de seleção por afinidade in vitro através de phage display serão aplicadas para o enriquecimento da biblioteca. Em seguida, anticorpos específicos anti-SARS-CoV-2 serão isoladas da biblioteca enriquecida e os clones com maior ligação ao alvo serão caracterizados em relação à afinidade. Com isso esperamos ter candidatos promissores para o uso terapêutico e/ou profilático da COVID-19 e contribuir para evitar a disseminação desta doença. (AU)

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