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Bioatividade de enzimas na degradação da matriz do biofilme para controle de doenças orais

Processo: 20/15092-1
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de outubro de 2021 - 30 de setembro de 2023
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
Pesquisador responsável:Antônio Pedro Ricomini Filho
Beneficiário:Antônio Pedro Ricomini Filho
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
Pesq. associados: Fernanda Cristina Petersen ; Igor Polikarpov
Assunto(s):Biofilmes  Cristalografia  Enzimas  Microbiologia oral 

Resumo

O acúmulo de biofilme na cavidade oral propicia o desenvolvimento de cárie e doença periodontal, entre outras doenças, afetando negativamente a qualidade de vida das pessoas, bem como servindo como reservatório de microrganismos capazes de provocar doenças sistêmicas. A presença de glucanos com ligações alfa-(1-3) na matriz extracelular possibilita que os biofilmes sejam fortemente estruturados e aderidos às superfícies, não sendo desorganizados pela inexistência de enzimas que degradem estes polissacarídeos na cavidade oral. Sendo assim, os objetivos deste estudo são sintetizar a enzima alfa -(1-3) endoglucanase de Paenibacillus curdlanolyticus, caracterizar a estrutura cristalina e avaliar a ação enzimática na degradação de biofilmes, de maneira isolada e em conjunto com outras enzimas. Enzima alfa-(1-3) endoglucanase será sintetizada por meio de clonagem do gene mutP (ADT91063.1) presente em P. curdlanolyticus visando a expressão de alto rendimento. Caracterização estrutural e bioquímica será realizada para compreender os mecanismos moleculares da degradação enzimática. Em acréscimo, será avaliado se a presença de outras enzimas, alfa-(1-4) glucanase, alfa-(1-6) glucanase e DNAse, poderiam contribuir otimizando o processo de degradação de biomoléculas da matriz do biofilme. Estudos in vitro serão realizados para definir a melhor condição de tratamento para degradação da matriz do biofilme utilizando modelo de biofilme cariogênico, avaliando biofilme e impacto no controle da desmineralização dental. Como resultado do projeto esperam-se cinco conquistas principais: implantação de centro de pesquisa para síntese de enzimas de interesse biológico com visibilidade de utilização na prática clínica e desenvolvimento de produtos, produção científica de qualidade em tema relevante e de inserção internacional, consolidação de metodologias de interesse que possibilitem constante inovação tecnológica, consolidação de rede de parcerias internacionais, e formação de recursos humanos altamente capacitados e qualificados. (AU)

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