Efeitos da suplementação probiótica pré-natal e perinatal na susceptibilidade ao desenvolvimento da doença periodontal experimental por meio de desafio microbiano na prole de camundongos

Resumo

O objetivo desta pesquisa será analisar como a suplementação pré-natal e perinatal de probiótico (PROB) afeta o desenvolvimento da doença periodontal (DP) experimental na prole de camundongos. Serão utilizados 140 camundongos prenhes divididas em 4 grupos (n=35): CM (animais sem DP e não tratados com probióticos); DPM (animais com DP e não tratados com probióticos); CMP (animais sem DP e tratados com probióticos) e DPMP (animais com DP e tratados com probióticos). A prole concebida por cada um destes grupos será dividida em 2 subgrupos: P1 (sem indução de DP; n=24) e P2 (com indução de DP; n=24). Após o acasalamento e confirmação da prenhez, os animais dos grupos DPM e DPMP receberão gavagens com Porphyromonas gingivalis w83 (5x109 unidades formadoras de colônias (UFC)/mL) durante 37 dias. Nos animais da prole (subgrupos P2), a DP será induzida seguindo o mesmo protocolo adotado para os grupos DPM e DPMP, sendo as gavagens realizadas durante 21 dias. Os animais dos grupos CMP e DPMP receberão 1 x 109 UFC/mL de Bifidobacterium animalis subsp. lactis HN019 administrados na água durante 56 dias, com início 14 dias antes do acasalamento dos animais. Os animais dos grupos CM, CMP, DPM e DPMP serão submetidos à eutanásia no 63o. dia do experimento. Os animais dos subgrupos P1 e P2 serão submetidos à eutanásia 63 dias após o nascimento. Serão avaliados: 1) presença do B. lactis HN019 na placenta de camundongos prenhes por meio de reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR); 2) perfil imunoinflamatório (IL-6, TNF-a, INF-y, IL-10, IL-1b, IL-8) presente nos tecidos placentários, tecidos periodontais e líquido amniótico por meio de ensaios imunoenzimáticos (Luminex); 3) composição microbiana intestinal e bucal por meio de qPCR; 4) expressão imunohistoquímica de receptores do tipo Toll (TLR-2 e TLR-4) nos tecidos intestinais e placentários; 5) severidade da inflamação presente na região de furca do 2º. molar superior por meio de análises histomorfométricas; 6) expressão de proteínas E-caderina, molécula de adesão juncional (JAM), DNA metiltransferase 3 (DNMT3), histona acetilada H3 (AcH3) e histona acetilada H4 (AcH4) nos tecidos periodontais e intestinais por meio de análises imunohistoquímicas; 7) perda óssea alveolar na região de 2o. molar superior por meio de microtomografia computadorizada por raio-x (Micro-CT). Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística (p < 0,05). (AU)