Auxílio à pesquisa 19/14078-8 - Nanotecnologia, Nanotubos de dióxido de titânio - BV FAPESP
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Avaliação do efeito da incorporação de nanotubos de dióxido de titânio ao cimento de ionômero de vidro convencional sobre suas propriedades biológicas

Resumo

Com o objetivo de determinar o impacto da adição de nanotubos de dióxido de titânio (n-TiO2) sobre as propriedades físico-químicas do Cimento de Ionômero de Vidro (CIV), nosso grupo de pesquisa realizou uma série de estudos in vitro (ARP FAPESP #2016/13786-0). De forma geral, os resultados obtidos demonstram que a presença dos n-TiO2 na composição dos CIVs produz uma melhora na resistência compressão e ao desgaste, aumento na microdureza de superfície sem alterar a rugosidade superficial, a adesividade ao substrato dentinário e a morfologia de fibroblastos cultivados sobre o CIV preparados com diferentes concentrações de nanotubos. Não se sabe, entretanto, se a presença de n-TiO2 pode influenciar as propriedades biológicas do CIV. Assim, o presente estudo terá como objetivos: 1. Investigar, quantitativa e qualitativamente, o efeito do CIV adicionado de n-TiO2 sobre o crescimento, a viabilidade, a morfologia, e o padrão de expressão gênica das principais bactérias envolvidas no processo cárie, S. mutans e L. acidophilus; e 2. Determinar se a presença de n-TiO2 incorporado ao CIV modifica o padrão de resposta de culturas de fibroblastos, com ou sem a presença de extrato total de Fusobacterium nucleatum (Fn), por meio da expressão de imunomarcadores. Para essa finalidade, diferentes concentrações (0%; 3%; 5%; 7% em peso) de n-TiO2, fase anatase, sintetizados pelo método alcalino (20 nm) serão incorporados ao CIV (Ketac Molar EasyMix®). A atividade antimicrobiana de CIV com ou sem a presença de n-TiO2 será determinada por meio dos seguintes experimentos: 1. Difusão em ágar (n=6): Discos de CIV contendo ou não n-TiO2, serão mantidos em contato com culturas dos microrganismos (S. mutans e L. acidophilus) e potenciais halos de inibição mensurados. Clorexidina (CLX 0,12%) e água destilada serão utilizadas como controles positivo e negativo, respectivamente; 2. Viabilidade celular (n=6): corpos-de-prova (cdp) de 2 x 4 mm serão confeccionados em cabine de fluxo laminar e a densidade de 1x108 UFC/mL das bactérias será utilizada na técnica de fluorescência live/dead baclight. O número de bactérias viáveis e não-viáveis será obtido proporcional a área total do cdp em três regiões randomizadas utilizando o programa ImageJ; 3. Morfologia celular (n=6): analisada por meio de microscópio eletrônico de varredura (MEV) nos períodos de 1, 3 e 7 dias (15 KV, 2000X) e 4. Expressão gênica (n=6): os níveis de transcritos para vicR, covR, gtfB, gtfC e gtfD para S. mutans e slpA, slpB e slpX para L. acidophilus serão determinados por utilizando-se reações de PCR em tempo real. Além disso, o efeito de n-TiO2 incorporados ao CIV sobre o padrão de expressão de imunomarcadores em culturas de fibroblastos (NIH/3T3) será determinado pelos seguintes ensaios: 1. Expressão proteica: fibroblastos serão cultivados sobre discos de CIV com e sem nanotubos por 12 e 18 h, tratados ou não com extrato de Fn (20, 2 and 0,2 ¼g/mL) para a determinação dos níveis de citocinas (IL-1², IL-10, IL-6 e TNF) utilizando-se a tecnologia multiplex (n=6); e 2. Expressão gênica: fibroblastos serão cultivados sobre discos de CIV com e sem nanotubos por 3, 6 e 18 h para a determinação dos níveis de transcritos de marcadores imunoinflamatórios que incluem IL-1², IL-10, IL-6, TNF, RANKL e OPG utilizando-se reações de PCR em tempo real (n=6). Os dados serão submetidos aos testes estatísticos apropriados para cada situação, considerando nível de significância de 5%. (AU)

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Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ISAAC JORDÃO DE SOUZA ARAÚJO; MARIANA GALLANTE RICARDO; ORISSON PONCE GOMES; PRISCILA ALVES GIOVANI; JÚLIA PUPPIN-RONTANI; VANESSA ARIAS PECORARI; ELIZABETH FERREIRA MARTINEZ; MARCELO HENRIQUE NAPIMOGA; FRANCISCO HUMBERTO NOCITI JUNIOR; REGINA MARIA PUPPIN-RONTANI; et al. Titanium dioxide nanotubes added to glass ionomer cements affect S. mutans viability and mechanisms of virulence. Brazilian Oral Research, v. 35, . (16/13786-0, 19/14078-8)
ANA MARA DA SILVA MORAIS; YSADORA MAYARA REALI PEREIRA; ISAAC JORDÃO DE SOUZA-ARAÚJO; DANIEL FURTADO SILVA; VANESSA GALLEGO ARIAS PECORARI; ORISSON PONCE GOMES; FRANCISCO HUMBERTO NOCITI-JÚNIOR; REGINA MARIA PUPPIN-RONTANI; WALDEMIR FRANCISCO VIEIRA-JUNIOR; PAULO NORONHA LISBOA-FILHO; et al. TiO2 nanotube-containing glass ionomer cements display reduced aluminum release rates. Brazilian Oral Research, v. 36, . (19/14078-8, 16/13786-0)
DE SOUZA ARAUJO, ISAAC JORDAO; RICARDO, MARIANA GALLANTE; GOMES, ORISSON PONCE; GIOVANI, PRISCILA ALVES; PUPPIN-RONTANI, JULIA; PECORARI, VANESSA ARIAS; MARTINEZ, ELIZABETH FERREIRA; NAPIMOGA, MARCELO HENRIQUE; NOCITI JUNIOR, FRANCISCO HUMBERTO; PUPPIN-RONTANI, REGINA MARIA; et al. Titanium dioxide nanotubes added to glass ionomer cements affect S. mutans viability and mechanisms of virulence. BRAZILIAN ORAL RESEARCH, v. 35, p. 12-pg., . (16/13786-0, 19/14078-8)
DA SILVA MORAIS, ANA MARA; REALI PEREIRA, YSADORA MAYARA; DE SOUZA-ARAUJO, ISAAC JORDAO; SILVA, DANIEL FURTADO; ARIAS PECORARI, VANESSA GALLEGO; GOMES, ORISSON PONCE; NOCITI-JUNIOR, FRANCISCO HUMBERTO; PUPPIN-RONTANI, REGINA MARIA; VIEIRA-JUNIOR, WALDEMIR FRANCISCO; LISBOA-FILHO, PAULO NORONHA; et al. TiO2 nanotube-containing glass ionomer cements display reduced aluminum release rates. BRAZILIAN ORAL RESEARCH, v. 36, p. 8-pg., . (16/13786-0, 19/14078-8)
KANTOVITZ, KAMILA ROSAMILIA; CARLOS, NATALIA RUSSO; SILVA, IVANIA APARECIDA PIMENTA SANTOS; BRAIDO, CAROLINE; COSTA, BRUNA CAROLINA; KITAGAWA, IGOR LEBEDENCO; NOCITI-JR, FRANCISCO HUMBERTO; BASTING, ROBERTA TARKANY; DE FIGUEIREDO, FRANCINE KUHL PANZARELLA; LISBOA-FILHO, PAULO NORONHA. TiO2 nanotube-based nanotechnology applied to high-viscosity conventional glass-ionomer cement: ultrastructural analyses and physicochemical characterization. ODONTOLOGY, v. 111, n. 4, p. 13-pg., . (16/13786-0, 19/14078-8)

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