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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

Functional analysis and importance for host cell infection of the Ca2+-conducting subunits of the mitochondrial calcium uniporter of Trypanosoma cruzi

Texto completo
Autor(es):
Chiurillo, Miguel A. [1, 2, 3] ; Lander, Noelia [1, 2, 3] ; Bertolini, Mayara S. [1, 2, 3] ; Vercesi, Anibal E. [3] ; Docampo, Roberto [1, 2, 3]
Número total de Autores: 5
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Univ Georgia, Ctr Trop & Emerging Global Dis, Athens, GA 30602 - USA
[2] Univ Georgia, Dept Cellular Biol, Athens, GA 30602 - USA
[3] Univ Estadual Campinas, Dept Patol Clin, Fac Ciencias Med, BR-13083 Campinas, SP - Brazil
Número total de Afiliações: 3
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL; v. 30, n. 14, p. 1676-1690, JUL 1 2019.
Citações Web of Science: 1
Resumo

We report here that Trypanosoma cruzi, the etiologic agent of Chagas disease, possesses two unique paralogues of the mitochondrial calcium uniporter complex TcMCU subunit that we named TcMCUc and TcMCUd. The predicted structure of the proteins indicates that, as predicted for the TcMCU and TcMCUb paralogues, they are composed of two helical membrane-spanning domains and contain a WDXXEPXXY motif. Overexpression of each gene led to a significant increase in mitochondrial Ca2+ uptake, while knockout (KO) of either TcMCUc or TcMCUd led to a loss of mitochondrial Ca2+ uptake, without affecting the mitochondrial membrane potential. TcMCUc-KO and TcMCUd-KO epimastigotes exhibited reduced growth rate in low-glucose medium and alterations in their respiratory rate, citrate synthase activity, and AMP/ATP ratio, while trypomastigotes had reduced ability to efficiently infect host cells and replicate intracellularly as amastigotes. By gene complementation of KO cell lines or by a newly developed CRISPR/Cas9-mediated knock-in approach, we also studied the importance of critical amino acid residues of the four paralogues on mitochondrial Ca2+ uptake. In conclusion, the results predict a hetero-oligomeric structure for the T. cruzi MCU complex, with structural and functional differences, as compared with those in the mammalian complex. (AU)

Processo FAPESP: 13/50624-0 - Sinalização por íons de cálcio em tripanossomatídeos
Beneficiário:Roberto Docampo
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa SPEC
Processo FAPESP: 14/13148-9 - Sinalização por íons de cálcio em tripanossomatídeos
Beneficiário:Miguel Angel Chiurillo Siervo
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 14/08995-4 - Sinalização por íons de cálcio em tripanosomatídeos
Beneficiário:Noelia Marina Lander Manfredi
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 15/25709-8 - Estudo funcional das proteínas MICU1 e MICU2 na sinalização por cálcio em Trypanosoma Cruzi
Beneficiário:Mayara Santos Bertolini
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado