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Explorando o papel das proteínas associadas à cromatina detectadas no Trypanosoma cruzi

Processo: 20/02708-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de abril de 2020
Vigência (Término): 31 de março de 2022
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
Pesquisador responsável:Julia Pinheiro Chagas da Cunha
Beneficiário:Herbert Guimarães de Sousa Silva
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:18/15553-9 - Indo a fundo na regulação da cromatina de Trypanosoma cruzi: identificação de novas moléculas e questionando seu possível impacto no controle da transcrição, AP.JP2
Assunto(s):Proteômica   Cromatina   Trypanosoma cruzi   Região de controle de locus gênico   CRISPR-Cas9   Imunoprecipitação da cromatina

Resumo

Para expandir o conhecimento sobre a regulação da cromatina do Trypanosoma cruzi, propusemos aproveitar metodologias de ponta que foram desenvolvidas para recuperar proteínas associadas à um determinado locus. Neste projeto de mestrado, exploraremos o papel de uma ou duas proteínas associadas à cromatina que serão detectadas através da metodologia mencionada acima. Idealmente, serão selecionadas as proteínas que foram encontradas de modo enriquecido em mais de um locus gênico. A função desses alvos serão exploradas através do sistema CRISPR/Cas9 para geração de parasitas Knouckouts (KO) e proteínas marcadas. Os parasitas KO serão avaliados da seguinte maneira: i. Quanto à capacidade de proliferação e diferenciação em tripomastigotas metacíclicos; e ii. Em relação a acessibilidade de interrupção gênica da cromatina e a taxa transcrição dos locus associados. Parasitas que expressam as proteínas marcadas serão utilizados para avaliarmos a localização celular dessas proteínas e identificarmos suas interações com outros componentes celulares utilizando a técnica de imunoprecipitação (IP). (AU)